[发明专利]一种定量检测血清中维生素B12的方法及预处理试剂盒有效
申请号: | 202110350613.8 | 申请日: | 2021-03-31 |
公开(公告)号: | CN113138236B | 公开(公告)日: | 2023-02-21 |
发明(设计)人: | 冯振;景叶松;弭兆元 | 申请(专利权)人: | 山东英盛生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 王志坤 |
地址: | 250101 山东省济南市高新区大正路1*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 定量 检测 血清 维生素 b12 方法 预处理 试剂盒 | ||
本发明涉及微量化合物检测技术领域,具体涉及一种定量检测血清中维生素B12的方法及预处理试剂盒。检测方法包括:采用甲醇和异丙醇沉淀、氮吹复溶的方法对血清样本进行预处理;配制氰钴胺、甲钴胺、羟钴胺、腺苷钴胺的对照品溶液;将预处理后的血清样本和配制的对照品溶液进行HPLC-MS/MS检测,所述甲醇和异丙醇混合溶液为甲醇:异丙醇体积比为9:1的混合溶液。本发明实施方式中建立的HPLC-MS/MS测定血清中氰钴胺、甲钴胺、羟钴胺、腺苷钴胺浓度的方法,检测灵敏度高,检出限低,准确度好,可用于临床上VB12家族的浓度监测,更真实的反映人血清中维生素B12含量,在药物浓度监测方面,能更清晰准确的辅助指导用药。
技术领域
本发明涉及微量化合物检测技术领域,具体涉及一种定量检测血清中维生素B12的方法及预处理试剂盒。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
维生素B12又叫钴胺素,是唯一一类含有金属元素的维生素,自然界中的维生素B12都是微生物合成的,高等动植物不能制造维生素B12。维生素B12是需要一种肠道分泌物(内源因子)帮助才能被吸收的唯一的一种维生素。有的人由于肠胃异常,缺乏这种内源因子,即使膳食中来源充足也会患恶性贫血。植物性食物中基本上没有维生素B12.它在肠道内停留时间长,大约需要三小时(大多数水溶性维生素只需要几秒钟)才能被吸收。维生素B12的主要生理功能是参与制造骨髓红细胞,防止恶性贫血,防止大脑神经受到破坏。
维生素B12的家族成员主要包括:氰钴胺、羟钴胺、腺苷钴胺和甲钴胺。它们在临床应用中,也有不同的意义。
(1)氰钴胺
氰钴胺需在体内转化为甲钴胺和腺苷钴胺后起效,其稳定性最好,在体内的吸收速度也位居四者之首,虽然它不能被人体直接利用,但它的功效决不亚于直接使用腺苷钴胺。
(2)甲钴胺
甲钴胺在人体内的吸收速度仅次于氰钴胺,它对神经组织具有良好的传递性,可促进核酸-蛋白-脂肪代谢,修复受损的神经组织,在临床上对有糖尿病引起的神经障碍、多发性神经炎等周围神经病,尤其对麻木、疼痛和麻痹有明显的疗效。在治疗周围神经病变方面,甲钴胺临床应用的安全性及疗效均优于腺苷钴胺和氰钴胺。
《2013糖尿病周围神经病变诊断和治疗共识》推荐补充B族维生素可以改善糖尿病神经病变,针对神经营养修复治疗推荐甲钴胺作为辅助治疗。
(3)羟钴胺
羟钴胺的水溶性较好,在尿中的代谢速度慢,故被称长效钴胺素。虽然其吸收速度不及氰钴胺和甲钴胺,但是它在眼部能达到较高浓度,有利于缓解视觉疲劳并营养视神经,因此它对烟草中毒性弱视有一定的疗效。
此外,羟钴胺在水溶液中能够快速与游离的氰根结合生成无毒的氰钴胺,因此它已被多个国家批准用于已知或疑似氰化物中毒的治疗。
(4)腺苷钴胺
腺苷钴胺在国际上被用作生化试剂和试验试剂,目前只有中国药典把它收载为药品。腺苷钴胺在中国市场上已经应用多年,作用与其它家族成员基本相同。
参考书有将腺苷钴胺划分为血液系统用药,它除用于治疗巨幼红细胞性贫血外还可用于营养不良性贫血、妊娠期贫血及放射线和化疗药物引起的白细胞减少症等。腺苷钴胺可以提高体内血红蛋白含量,改善贫血,疗效明显。
血清维生素B12的测定是最直接的鉴定方法。目前血清检测方法主要有化学发光法、液相色谱-串联质谱法、液相色谱-电感耦合等离子体法等。其中液相色谱-串联质谱法只单一检测VB12家族中的氰钴胺,并没有同时检测VB12家族的四重物质,
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