[发明专利]一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法在审
申请号: | 202110361623.1 | 申请日: | 2021-04-02 |
公开(公告)号: | CN113092470A | 公开(公告)日: | 2021-07-09 |
发明(设计)人: | 宁玉翠;周东兴;王嘉昊;李云飞;刘煜 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | G01N21/84 | 分类号: | G01N21/84;C12Q1/02 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 张换男 |
地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 biolog 平板 分析 单一 碳源 提取 方法 | ||
1.一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法,其特征在于,所述方法具体包括以下步骤:
步骤一、吸取样品稀释液至Biolog微平板的各个包含单一碳源的微孔中,吸取蒸馏水至Biolog微平板的各个不包含碳源的微孔中,即吸取蒸馏水至Biolog微平板的各个空白的微孔中;
测量各微孔内的初始光密度值,对含有同一种碳源的微孔的初始光密度值取平均,将得到的平均值作为对应种类碳源的初始光密度值;再对各个空白微孔的初始光密度值取平均,将取得的平均值作为对照组的初始光密度值;
并将Biolog微平板置于恒温培养箱中进行培养,培养周期总数为T;
步骤二、对于任意的一个培养周期,在该培养周期结束后,测量各微孔内的光密度值;
对含有同一种碳源的微孔的光密度值取平均,将得到的平均值作为对应种类碳源的光密度值;再对各个空白微孔的光密度值取平均,将取得的平均值作为对照组的光密度值;
步骤三、同理,在各培养周期结束后,均进行一次步骤二的操作;
步骤四、根据步骤二和步骤三所得到的光密度值,计算出在每个培养周期内对各种碳源的利用强度;
步骤五、分别计算出整个培养期内对各种碳源的累积利用强度。
2.根据权利要求1所述的一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法,其特征在于,所述步骤一中,吸取至各微孔内的样品稀释液的体积均为150μL,吸取至各微孔内的蒸馏水的体积也均为150μL。
3.根据权利要求1所述的一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法,其特征在于,所述恒温培养箱的培养温度为28℃。
4.根据权利要求1所述的一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法,其特征在于,所述培养周期总数T的取值为7。
5.根据权利要求1所述的一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法,其特征在于,所述步骤二中测量各微孔内的光密度值,是采用酶标仪读取590nm波长的光密度值。
6.根据权利要求4所述的一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法,其特征在于,所述步骤四的具体过程为:
其中,t=1,2,…,T,为在第t个培养周期内对第n种碳源的利用强度,n=1,2,…,31,为中间变量。
7.根据权利要求6所述的一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法,其特征在于,所述中间变量为:
其中,为经过t个培养周期后对照组的光密度值,为经过t个培养周期后第n种碳源的光密度值,为经过t-1个培养周期后对照组的光密度值,为经过t-1个培养周期后第n种碳源的光密度值。
8.根据权利要求7所述的一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法,其特征在于,所述步骤五的具体过程为:
其中,Qn为在整个培养期内,对第n种碳源的累积利用强度。
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