[发明专利]一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法

说明书

一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法，它属于微生物群落功能多样性分析领域。本发明解决了现有方法中微生物对单一碳源利用情况的统计分析结果与实际存在偏差的问题。本发明根据每个培养周期结束后测量的微孔内光密度值，来分别获得对各种碳源的累积利用强度，采用本发明方法对微生物群落功能多样性的变化情况进行分析，能直观地表征Biolog微平板中31种碳源的代谢利用情况，使所获得的微生物对单一碳源利用情况的分析结果与实际结果相符，解决了在现有方法中，微生物对单一碳源利用情况的统计分析结果与实际存在偏差的问题，提高了微生物群落功能多样性分析的准确性和科学性。本发明可以应用于微生物群落功能多样性分析。

技术领域

本发明属于微生物群落功能多样性分析领域，具体涉及一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法。

背景技术

现行的Biolog微平板分析法是利用板中每孔平均颜色变化率(Average WellColor Development,AWCD)计算Shannon、Simpson、Brillouin、McIntosh等微生物群落功能多样性指数(刺参养殖池塘水体微生物群落功能多样性的季节变化[J].应用生态学报；长期施肥对农田黑土微生物群落功能多样性的影响[J].应用生态学报；施氮对不同有机碳水平桉树林土壤微生物群落碳代谢的影响[J].生态学报)。但是由于AWCD在计算过程中忽略了碳源的个体变化情况，造成微生物对单一碳源利用情况的统计分析存在不可避免的偏差，进而致使得到的一系列的微生物群落多样性指数的科学性受到质疑。

发明内容

本发明的目的是为解决现有方法中微生物对单一碳源利用情况的统计分析结果与实际存在偏差的问题，而提出了一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法。

本发明为解决上述技术问题所采取的技术方案是：一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法，所述方法具体包括以下步骤：

步骤一、吸取样品稀释液至Biolog微平板的各个包含单一碳源的微孔中，吸取蒸馏水至Biolog微平板的各个不包含碳源的微孔中，即吸取蒸馏水至Biolog微平板的各个空白的微孔中；

测量各微孔内的初始光密度值，对含有同一种碳源的微孔的初始光密度值取平均，将得到的平均值作为对应种类碳源的初始光密度值；再对各个空白微孔的初始光密度值取平均，将取得的平均值作为对照组的初始光密度值；

并将Biolog微平板置于恒温培养箱中进行培养，培养周期总数为T；

步骤二、对于任意的一个培养周期，在该培养周期结束后，测量各微孔内的光密度值；

对含有同一种碳源的微孔的光密度值取平均，将得到的平均值作为对应种类碳源的光密度值；再对各个空白微孔的光密度值取平均，将取得的平均值作为对照组的光密度值；

步骤三、同理，在各培养周期结束后，均进行一次步骤二的操作；

步骤四、根据步骤二和步骤三所得到的光密度值，计算出在每个培养周期内对各种碳源的利用强度；

步骤五、分别计算出整个培养期内对各种碳源的累积利用强度。

本发明的有益效果是：本发明提出了一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法，本发明根据每个培养周期结束后测量的微孔内光密度值，来分别获得对各种碳源的累积利用强度，采用本发明方法对微生物群落功能多样性的变化情况进行分析，能直观地表征Biolog微平板中31种碳源的代谢利用情况，使所获得的微生物对单一碳源利用情况的分析结果与实际结果相符，解决了在现有方法中，微生物对单一碳源利用情况的统计分析结果与实际存在偏差的问题，提高了微生物群落功能多样性分析的准确性和科学性。

附图说明

图1为本发明的一种用于Biolog微平板分析的单一碳源提取方法的流程图。

具体实施方式