[发明专利]一种汞离子的检测方法

权利要求书

1.一种汞离子的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、获取SG I和NMM的激发光谱，得到SG I和NMM的共同激发波长，采用所述共同激发波长激发SG I和NMM分别获得两者的发射峰520nm和615nm；

S2、将不同已知浓度的Hg²⁺分别加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到多组第一混合液；分别向每组所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多组第二混合液；其中，P1序列为：5’-AGGGTTTTGGGTTTTGGGTTTTGGGA-3’，P2序列为：5’-ACCCTTTTCCCTTTTCCCTTTTCCCT-3’；

S3、获取每组所述第二混合液的荧光光谱图，得到每组所述第二混合液在发射峰520nm和615nm对应的荧光强度的比值R，得到Hg²⁺的浓度与荧光信号变化R/R₀的对应关系；其中，R₀为Hg²⁺的浓度为0时，所述第二混合液在发射峰520nm和615nm处的荧光强度的比值；

S4、根据待测液的荧光光谱图，结合所述Hg²⁺的浓度与荧光信号变化R/R₀的关系，得到所述待测液中Hg²⁺的浓度。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，得到所述待测液中Hg²⁺的浓度进一步包括：

S41、将所述待测液加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到第三混合液；

S42、向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl得到第四混合液；

S43、获得待测液的荧光光谱图，得到所述待测液在发射峰520nm和615nm处的荧光比值R₁，结合所述待测液的荧光信号变化R₁/R₀和所述Hg²⁺的浓度与荧光信号变化R/R₀的关系，得到所述待测液中Hg²⁺的浓度。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤S3中，所述Hg²⁺的浓度与荧光信号变化R/R₀的关系为Y＝2.161X－0.3456，Y为R/R₀，X为Hg²⁺的浓度。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤S1中，所述共同激发波长在380nm-400nm之间。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，在步骤S1中，所述共同激发波长为395nm。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤S3中，还包括用酶标仪来记录发射峰520nm和615nm处的荧光信号的变化。

7.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，在步骤S41中，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐缓冲液中，磷酸盐的浓度为20mM，P1和P2的浓度为200nM。

8.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，在步骤S42中，添加7μM以上的NMM，添加3.92μM以上的SG I至所述第四混合液中。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤S41中，将所述待测液加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中，并在37℃下反应2-3h得到多组所述第三混合液。

10.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，在步骤S42中，向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl，并在37℃下反应30min以上得到所述第四混合液。