[发明专利]一种汞离子的检测方法

说明书

本发明涉及一种汞离子的检测方法。该方法包括S1、采用所述共同激发波长激发SG I和NMM分别获得两者的发射峰520nm和615nm；S2、将不同已知浓度的Hg²⁺分别加入缓冲液中得到多组第一混合液；分别向每组所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多组第二混合液；S3、得到每组所述第二混合液在发射峰520nm和615nm对应的荧光强度的比值R，得到Hg²⁺的浓度与荧光信号变化R/R₀的对应关系；S4、根据待测液的荧光光谱图，结合所述Hg²⁺的浓度与荧光信号变化R/R₀的关系，得到所述待测液中Hg²⁺的浓度。该方法能够实现精准又不受其他离子干扰，且检测限低的检测汞离子。

技术领域

本发明涉及汞离子浓度的检测分析技术领域，尤其涉及一种汞离子的检测方法。

背景技术

众所周知，汞离子(Hg²⁺)是一种有毒重金属离子。由于Hg²⁺与巯基具有较高的亲和力，可以通过形成Hg-S键使一些关键酶和蛋白质失活，从而对人类健康造成严重损害，如引起耳聋、视力丧失和运动、认知障碍等。同时，Hg²⁺具有生物累积效应，可通过食物链在人体中富集。因此，即使在低浓度下，它也对人类健康有害。世界卫生组织(WHO)规定的饮用水中最高允许Hg²⁺含量为30nM。因此，开发一种简单、灵敏、选择性的Hg²⁺检测方法是非常重要和迫切的。

传统方法主要依靠原子吸收光谱法(AAS)、电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)、X射线荧光光谱法(R-FS)、冷蒸气原子荧光光谱法(CVAF)和高效液相色谱法(HPLC)等，但这些方法通常需要昂贵的设备和专业的操作人员。寡核苷酸DNA生物传感器由于成本低、稳定性高、易于修饰等优点，引起人们的广发关注。然而，这类方法大多只依赖于单个荧光信号的变化(引起信号上升或下降)，通常会受到环境条件波动的影响，从而导致检测的稳定性和可靠性较低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：如何实现精准又不受其他离子干扰，且检测限低的检测汞离子。

本发明提出一种汞离子的检测方法，包括以下步骤：

S1、利用荧光分光光度计扫描SG I和NMM的激发光谱，获得SG I和NMM的共同激发波长，采用所述共同激发波长激发SG I和NMM分别获得两者的发射峰520nm和615nm；

S2、将不同已知浓度的Hg²⁺分别加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到多组第一混合液；分别向每组所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多组第二混合液；其中，P1序列为：5’-AGGGTTTTGGGTTTTGGGTTTTGGGA-3’，P2序列为：5’-ACCCTTTTCCCTTTTCCCTTTTCCCT-3’；

S3、获取每组所述第二混合液的荧光光谱图，得到每组所述第二混合液在发射峰520nm和615nm对应的荧光强度的比值R，得到Hg²⁺的浓度与荧光信号变化R/R₀的对应关系；其中，R₀为Hg²⁺的浓度为0时，所述第二混合液在发射峰520nm和615nm处的荧光强度的比值；

S4、根据待测液的荧光光谱图，结合所述Hg²⁺的浓度与荧光信号变化R/R₀的关系，得到所述待测液中Hg²⁺的浓度。

进一步地，得到所述待测液中Hg²⁺的浓度进一步包括：

S41、将所述待测液加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到第三混合液；

S42、向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl得到第四混合液；