[发明专利]棱子芹属植物活性成分制备方法及其在制备抗炎药物中的应用

说明书

本发明涉及天然植物中有效成分的分离纯化技术领域，具体涉及一种伞形科棱子芹属植物P.candollei中活性成分的制备方法，先采用醇提对P.candollei进行提取获得粗提物，然后采用高速逆流色谱对粗提物进行分离，高速逆流色谱采用的溶剂系统为正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水两相溶剂系统，使用前分取上相和下相，上相用作固定相，下相用作流动相；得到以下化合物单体：本发明建立的分离纯化方法实现了P.candollei植物中9个单体成分的成功分离，得到的各个单体纯度均大于98％，分离纯化效果好；且分离纯化得到的化合物7和8能够有效抑制NO产生。

技术领域

本发明涉及天然植物中有效成分的分离纯化技术领域，具体涉及棱子芹属植物活性成分制备方法及其在制备抗炎药物中的应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

棱子芹属于伞形科具有镇痛作用、抗炎和抗疟疾作用，还用作调味品和草药香水。在中国民间医学中，心叶棱子芹被用作发汗、止痛、解热药。从棱子芹属植物中已经发现了多种化学成分，如萜类、类固醇、皂苷、酯、呋喃香豆素和双香豆素等。

Pleurospermum candollei(DC.)Benth.Ex C.B.Clark.(P.candollei)为棱子芹属植物变种，可用于治疗腹泻、胃部疾病、心脏疾病、降血压、降低胆固醇、胃部疾病和腹部疾病等。此外，还可用于治疗关节、背部疼痛，男性和女性不育等。然而，到目前为止，尚未对P.candollei植物的化学分离成分进行分离研究。

高速逆流色谱(HSCCC)作为一种无支撑的液-液分配色谱技术，已被广泛用于从天然产物中纯化生物活性成分。与硅胶柱色谱法相比，HSCCC消除了固相支持物的不可逆吸附、峰拖尾、失活和污染等问题。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种棱子芹属植物活性成分制备方法及其在制备抗炎药物中的应用，采用高速逆流色谱法(HSCCC)对伞形科棱子芹属植物P.candollei进行研究，采用连续进样和循环分离等方法成功从P.candollei植物中分离得到9化合物单体，各个化合物单体纯度均大于98％，分离纯化效果好；分离得到的活性成分具有良好的抗炎效果。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下所述：

在本发明的第一方面，提供一种伞形科棱子芹属植物P.candollei中活性成分的制备方法，所述方法为：先采用醇提对P.candollei进行提取获得粗提物，然后采用高速逆流色谱对粗提物进行分离，得到以下化合物单体：

高速逆流色谱采用的溶剂系统为正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水两相溶剂系统，使用前分取上相和下相，上相用作固定相，下相用作流动相。

在本发明的第二方面，提供一种伞形科棱子芹属植物P.candollei中活性成分的检测方法，包括第一方面所述的伞形科棱子芹属植物P.candollei中活性成分的制备方法，采用HPLC-ESI-MS对高速逆流色谱分离的每个组分进行检测。

在本发明的第三方面，提供一种第一方面所述的制备方法制备得到的伞形科棱子芹属植物P.candollei中活性成分在制备抗炎药物中的应用。

本发明的具体实施方式具有以下有益效果：

本发明建立了伞形科棱子芹属植物P.candollei中活性成分的的高速逆流色谱分离纯化方法，通过对高速逆流色谱溶剂体系的选择以及分离条件的摸索，从而实现了P.candollei植物中9个单体成分的成功分离制备，得到的各个单体纯度均大于98％，分离纯化效果好；且分离纯化得到的化合物7和8能够有效抑制NO产生。

附图说明