[发明专利]一种泽泻三萜类化合物及其制备方法、结构表征方法和应用

说明书

本发明提供一种泽泻三萜类化合物及其制备方法、结构表征方法和应用。本发明以泽泻干燥块茎为原料，经特定浓度的乙醇提取，石油醚、二氯甲烷萃取，然后以不同比例的石油醚‑乙酸乙酯对萃取得到的二氯甲烷相进行粗分，再以不同比例的甲醇‑水进行洗脱分离，最后经半制备液相色谱分离纯化，得到式Ⅰ、式Ⅱ所示的两个新型结构的泽泻单体化合物。通过本发明提供的泽泻三萜类化合物的分离纯化方法，一次性可获取多个高纯度的新型结构的三萜类化合物，为产业化开发泽泻三萜类化合物制剂提供高纯度的原料，且分离方法简单，分离效率高，具有极高的推广价值。

技术领域

本发明涉及中药活性成分的分离提纯技术领域，尤其涉及一种泽泻三萜类化合物及其制备方法、结构表征方法和应用。

背景技术

泽泻为泽泻科植物东方泽泻(Alisma orientale(Sam.)Juz)、泽泻(A.plantago-aquatica Linn.)的干燥块茎。泽泻具有悠久的药用历史，《神农本草经》将其列为上品，具有利水渗湿、泄热、化浊降脂的功效，应用于多种中医临床复方和中成药中。药理学研究表明泽泻的醇提物和水提物及单体化合物具有利尿、抗结石及肾脏保护、降血糖、降血脂、抗炎等多种药理活性。三萜类化合物是泽泻中个数占比最大，药理活性报道最多的一类化合物，他们的骨架多为原萜烷型四环三萜，这也是该药材的特征性成分。泽泻中的四环三萜的结构多变，主要包括原萜烷17位连接脂肪链、原萜烷17位连接带有氧桥的脂肪链、原萜烷17位连接脂肪链与16位成环及降三萜等。迄今为止，分离得到的泽泻三萜类化合物已达97种，占目前泽泻中已知所有已知化合物个数(226个)的43％。

不同的泽泻单体具有不同的药理活性。为了揭示以泽泻三萜类化合物为主要活性成分的中药治疗疾病的物质基础，并充分利用泽泻三萜类的药理活性，需要将泽泻三萜类进行分离纯化，但是泽泻中存在大量结构相似的三萜类化合物使得泽泻三萜类单体化合物的分离十分困难。且泽泻三萜类化合物具有多种药理活性，分离新的泽泻三萜类化合物可以为泽泻新药的开发提供物质基础。因此，如何实现对泽泻中三萜类化合物的分离纯化具有十分重要的意义。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供一种泽泻三萜类化合物及其制备方法、结构表征方法和应用。

本发明中所述泽泻为川泽泻，药材部位为干燥块茎。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是：

一种泽泻三萜类化合物，其结构式如下所示：

相对于现有技术，本发明提供了全新结构的两种泽泻三萜类化合物，丰富了泽泻三萜化合物的数据库，为泽泻三萜类化合物的活性研究和单一成分的新药开发提供了物质基础。

本发明还提供了上述泽泻三萜类化合物的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、向泽泻的醇提浓缩液中加入石油醚萃取，收集水相；向所得水相中加入二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷相，减压浓缩至干，得泽泻干浸膏；

步骤二、将所述泽泻干浸膏加入硅胶层析柱中，用体积比为6:1-5:1的石油醚-乙酸乙酯溶液洗脱，弃去洗脱液，然后分别依次用体积比为16:5-14:5、11:5-9:5的石油醚-乙酸乙酯溶液洗脱，薄层色谱监测，收集洗脱液，蒸干，得样品a和样品b；

步骤三、将所述样品a、样品b分别加入反相硅胶层析柱中，用体积比为9:11-11:9的甲醇-水溶液洗脱，弃去洗脱液，然后用体积比为9:4-5:2的甲醇-水洗脱，薄层色谱监测，收集洗脱液，分别对应得到组分a’和组分b’；

步骤四、将所述组分a’和组分b’分别经半制备液相色谱分离纯化，分别得到式Ⅰ和式Ⅱ所示的化合物；其中，色谱柱为C18柱，流动相为乙腈-水溶液，检测波长为205-215nm，等度洗脱。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：