[发明专利]苦参组分的HPLC检测方法

权利要求书

1.苦参组分的HPLC检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)色谱条件与系统适用性试验：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱：WatersT3 C18柱，4.6×250mm，5μm或等效柱，流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(三乙胺调pH值至8.0)(B)，梯度洗脱(程序见表1)。流速：1.0ml/min，检测波长：208nm，柱温：25℃，进样量：20μl，理论板数按槐定碱峰计算应不低于5000。

表1梯度洗脱程序

(2)溶液制备：

①供试品溶液制备：取本品粉末(过三号筛)约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液0.5ml湿润，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率320W，频率40kHz)45分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，回收溶剂至干，残渣加乙腈-0.1％磷酸溶液(三乙胺调节pH值至8.0)(11：89)适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加乙腈-0.1％磷酸溶液(三乙胺调节pH值至8.0)(11：89)至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，5000转/min离心5min后用0.45μm的滤膜过滤，即得供试品溶液。

②对照品溶液的制备：精密称取氧化苦参碱对照品、氧化槐果碱对照品、槐定碱对照品、苦参碱对照品和槐果碱对照品适量，用乙腈-0.1％磷酸溶液(三乙胺调节pH值至8.0)(11：89)定量稀释制成每1ml含氧化苦参碱150μg、氧化槐果碱100μg、槐定碱75μg、苦参碱10μg、槐果碱10μg的混合溶液，即得。

(3)测定：

分别精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记录色谱图。供试品溶液中各组分的含量用对照品溶液以外标法计算。

2.权利要求1所述的苦参组分的HPLC检测方法，其特征在于，所述的检测器为紫外-可见分光检测器。

3.权利要求1所述的苦参组分的HPLC检测方法，其特征在于，用HPLC法将氧化苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱、苦参碱和槐果碱分离，可单独测定这五个组分的含量。