[发明专利]一种重组杆状病毒及其制备方法和应用

说明书

本发明公开的是一种重组杆状病毒及其制备方法和应用，重组杆状病毒包括超氧化物歧化酶SOD基因和烟酰胺磷酸核糖转移酶NAMPT基因，SOD基因为嗜高温菌超氧化物歧化酶SOD基因，分别根据SOD基因、NAMPT基因的OFR设计引物，利用双酶切、分子克隆的方法，将SOD和NAMPT的ORF连接至同一杆状病毒载体上，构建重组载体，蚕蛹粉的制备方法：将重组杆状病毒感染家蚕细胞，得到病毒粒子；将病毒粒子接种家蚕蛹，5‑6天后榨汁，8000rpm离心后取上清冻干，获得蚕蛹冻干粉，重组杆状病毒以及其表达的重组蛋白在抗衰老药物方面的应用，具有抗衰老，成本低廉，效果显著等技术特点。

技术领域

本发明涉及一种病毒及其制备方法和应用，更具体一点说，涉及一种重组杆状病毒及其制备方法和应用，涉及生物技术制药工程中的基因工程生产多肽类药物技术领域。

背景技术

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)，别名肝蛋白，简称SOD， SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，如果人体不断地补充SOD将具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化酶是1938年首次从牛红血球中分离得到，至今对SOD的研究己有多年历史， 1969年正式命名为超氧化物歧化酶，SOD作为一种人体内最重要的酶之一，它所起的作用是不可小视的。临床上可用SOD治疗和预防急性炎症和水肿、氧中毒(预防措施，进入高压氧舱的工作人员，可预先注射SOD、氧中毒治疗、自身免疫性疾病(早期治疗)、肺气肿、辐射病及辐射防护、老年性白内障等，同时还具有抗衰老的功能。NAMPT即烟酰胺磷酸核糖转移酶，又被成为内脏脂肪素，在体内广泛地存在于脂肪组织、肝脏、脾、肾脏等组织中，是一种多功能蛋白，参与机体内多种生理过程的调控，同时也参与调控心肌细胞的 NAD水平。相关实验表明，心肌细胞的NAD水平随NAMPT的表达量而改变， NAMPT是心肌细胞合成NAD过程的一种重要物质，它可以保护心脏避免自噬，防止动脉粥样硬化，还可抑制血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥厚。关于NAMPT的研究国际上目前处于初生状态，研发出高效健康安全的NAMPT药物，可以在心脏病等领域得到很好的应用。联合表达SOD和NAMPT是必然趋势，也是一条可行的通路，能够用于制备有效抗衰老的药物。

发明内容

本发明目的在于将NAMPT的目的基因与耐高温的SOD目的基因共同导入家蚕杆状病毒上，用家蚕杆状病毒转染家蚕和其幼虫，将二者的目的基因在家蚕中联合表达生成新型联合蛋白，实现生产SOD和NAMPT的新型途径。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

一种重组超氧化物岐化酶基因的杆状病毒，杆状病毒包括超氧化物歧化酶 SOD基因和烟酰胺磷酸核糖转移酶NAMPT基因，SOD基因为嗜高温菌超氧化物歧化酶SOD基因。

优选的，所述SOD基因的OFR序列为SEQ ID NO.1，所述SEQ ID NO.1为