[发明专利]一种高迁徙间充质干细胞及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 202110370692.9 申请日: 2021-04-07
公开(公告)号: CN113106059B 公开(公告)日: 2023-08-15
发明(设计)人: 吴耀炯;莫妙华 申请(专利权)人: 清华大学深圳国际研究生院
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775;A61K35/28;A61P9/10;A61P25/28;A61P29/00;A61P37/02;A61P37/06;A61P43/00
代理公司: 北京三友知识产权代理有限公司 11127 代理人: 刘鑫;姚亮
地址: 518055 广东省深圳市*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 迁徙 间充质 干细胞 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种高迁徙间充质干细胞在制备治疗心肌梗死的药物中的应用,所述高迁徙间充质干细胞采用包括以下步骤的制备方法制备获得:

将间充质干细胞接种混悬于间充质干细胞培养液中,在细胞培养旋转瓶内进行流动液体培养,培养过程中无需添加微载体,培养结束后收集细胞球,冲洗并消化形成单细胞,即得到高迁徙间充质干细胞,

其中,所述间充质干细胞的接种密度为3×105个细胞/mL,

所述间充质干细胞培养液包括含5%人血小板裂解物的低葡萄糖DMEM培养液,并且还添加有1%的人血白蛋白、6.25nmol/L的曲古菌素A、5μg/mL的人纤连蛋白和5ng/mL的bFGF,

所述高迁徙间充质干细胞的表面表达细胞迁移的受体CXCR4的表达率30%以上,其中,在细胞培养旋转瓶内进行流动液体培养的条件为:37℃、5% CO2条件下,搅拌速度为60rpm,培养时间为60h。

2.根据权利要求1所述的应用,其中,培养结束后收集细胞球的方法包括离心法、过滤法或自然沉降法;

冲洗并消化形成单细胞的步骤包括:

采用磷酸缓冲液冲洗收集的细胞球,然后用胰蛋白酶消化形成单细胞;

所述磷酸缓冲液为无钙镁离子的磷酸缓冲液;

所述胰蛋白酶为含有EDTA的胰蛋白酶。

3.根据权利要求1所述的应用,其中,所述高迁徙间充质干细胞的平均直径为11~14μm。

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