[发明专利]一种检测滤棒抑菌效果的方法

权利要求书

1.一种检测滤棒抑菌效果的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1)菌株活化：

制备培养基斜面，将测试菌株接种至培养基斜面上，置于36℃恒温培养箱中培养20-24h；重复步骤1)，至菌株活化至第3代；

步骤2)菌悬液制备：

取第3代培养基斜面的新鲜培养物，吸取0.03mol/L，pH 7.2的无菌磷酸缓冲液3.0mL加入斜面试管内，反复吹吸后将洗脱液移至无菌离心管中，涡旋混匀；再用无菌磷酸缓冲液稀释成1.0×10⁵-5.0×10⁵CFU/mL的菌悬液；

步骤3)样品制备：

采用无菌操作，选取由待测滤棒和对照滤棒制成的样片；其中，以未添加抑菌成分的同材质滤棒作为对照滤棒；

步骤4)加样及作用：

用无菌镊子各取2片待测滤棒的样片和对照滤棒的样片，分别置于无菌培养皿内，每个样片滴加0.1mL步骤1)的菌悬液，置于20℃恒温培养箱内，接触作用20-24h；

步骤5)菌落计数：

作用结束后，夹取染菌样片分别置于含5.0mL无菌磷酸缓冲液的无菌离心管中，振荡混匀后，收集洗脱液；用无菌磷酸缓冲液将洗脱液，制备成10倍系列稀释匀液；取10^-2、10^-3、10^-4三个稀释度的样品匀液，每个稀释度各取1mL加入无菌培养皿中，每管洗脱液接种2个培养皿，再加入经过121℃高压灭菌15min后冷却至45℃的相应的琼脂培养基，混匀后置于36℃恒温培养箱中培养48h；计数存活菌落数；

步骤6)抑菌率计算：

按照公式①计算抑菌率：

式中：X为抑菌率，％；

C₀为对照样品组的平均菌落数，单位为CFU/片；

C₁—测试样品组的平均菌落数，单位为CFU/片。

2.根据权利要求1所述的检测滤棒抑菌效果的方法，其特征在于，步骤1)中测试菌株为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌或变形链球菌；金黄色葡萄球菌和大肠杆菌采用营养琼脂培养基培养；白色念珠菌采用沙氏琼脂培养基培养；变形链球菌采用脑心浸出液琼脂培养基培养。

3.根据权利要求2所述的检测滤棒抑菌效果的方法，其特征在于，所述步骤1)和步骤5)中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌或白色念珠菌在需氧条件下培养；变形链球菌在厌氧条件下培养。

4.根据权利要求1所述的检测滤棒抑菌效果的方法，其特征在于，步骤3)中的样片为直径5mm的圆形样片。