[发明专利]一种含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物及制备方法、应用

权利要求书

1.一种含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物，其特征在于，具有如下结构：

。

2.一种如权利要求1所述的含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1，将巯基烷酸溶解于反应溶剂中，搅拌下逐滴加入保护试剂的二氯甲烷溶液，保护试剂与巯基烷酸的反应投料摩尔比为1:1-1:5，室温反应4-12 h；反应结束后，旋蒸除去二氯甲烷，浓缩后，重结晶纯化，得到三苯基醚保护的巯基烷酸；

步骤2，将三苯基醚保护的巯基烷酸溶解于反应溶剂中，搅拌下加入偶合试剂，两者投料摩尔比为1:1-1:2.5，35-45℃活化反应2-4 h；加入甘油磷酸胆碱和催化剂，反应12-14h；用含有10%冰醋酸的乙醚溶液沉降反应液，浓缩后用洗脱溶剂三氯甲烷/甲醇/水体积比为：v/v/v=65:25:4柱层析，得到双三苯基醚保护巯基烷酸甘油磷脂酰胆碱；

步骤3，将双三苯基醚保护巯基烷酸甘油磷脂酰胆碱溶解于脱保护试剂，脱保护时间为1.5-3 h；在50℃下，旋转蒸发法除去脱保护试剂；将上述得到的脱保护的双巯基长碳链磷脂酰胆碱溶解于反应溶剂，搅拌下加入二硫二吡啶，脱保护的双巯基长碳链磷脂酰胆碱和二硫二吡啶两者摩尔比1:2.5-1:6，升温至35-45℃，反应24-48 h；反应结束后，浓缩后用洗脱溶剂三氯甲烷/甲醇/水体积比为：v/v/v=65:25:4柱层析，得到含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物。

3.如权利要求2所述的含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物的合成方法，其特征在于，步骤1中，所述保护试剂为三苯基氯甲烷；所述巯基烷酸为巯基十一烷酸、巯基十二烷酸或巯基十六烷酸；所述反应溶剂为二氯甲烷、甲苯、氯仿或二甲基甲酰胺；所述重结晶纯化中的重结晶溶剂为乙酸乙酯、乙腈或石油醚。

4.如权利要求2所述的含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物的合成方法，其特征在于，步骤2中，所述反应溶剂为二甲基亚砜、二氯甲烷或二甲基亚砜和二氯甲烷的混合物；所述偶合试剂为N,N'-羰基二咪唑或1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯；硅胶柱色谱纯化，得到白色蜡状固体双巯基保护的长碳链磷脂酰胆碱，所述洗脱溶剂为三氯甲烷、甲醇、水体积比为65:25:4混合物。

5.如权利要求2所述的含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物的合成方法，其特征在于，步骤3中，所述脱保护试剂为三氟乙酸、氯甲烷溶液体积比为1:1混合物；所述脱保护试剂与双巯基保护的长碳链磷脂酰胆碱的摩尔比为5:1-10:1，50℃进行反应；所述反应溶剂为二氯甲烷、甲醇、三氯甲烷或二甲基甲酰胺；硅胶柱色谱纯化，得到白色蜡状固体，所述洗脱溶剂为三氯甲烷、甲醇、水体积比为65:25:4的混合物。

6.一种由权利要求1所述的含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物制备的空白功能化脂质体，其特征在于，该脂质体的平均粒径120-300 nm，呈球形，大小均一。

7.如权利要求6所述的含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物制备的空白功能化脂质体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1）将含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物与助磷脂按照一定摩尔比溶解于三氯甲烷、甲醇按着体积比为4:1的溶液中，含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物的浓度为1.5-4 mg/mL，所述含有π-π共轭吡啶基脂质衍生物与大豆卵磷脂、胆固醇和DSPE-PEG2000的摩尔比为50-60:30-45:32-45:4-8；

2）脂质溶液在N₂氛围下均匀分散成膜，35℃真空干燥10-14 h；

3）利用去离子水或磷酸盐缓冲液进行脂质水化， 50-60℃水化1-3 h；经超声处理和0.22μm微孔滤膜过滤，得到浓度为1.5-4 mg/mL的π-π共轭吡啶基功能化脂质体，保存于4℃，即可。