[发明专利]胡芦巴蛋白及其分离提取方法和在制备骨髓HSC清除辅助剂中的应用有效
| 申请号： | 202110380811.9 | 申请日： | 2021-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN113214351B | 公开（公告）日： | 2021-11-30 |
| 发明（设计）人： | 李思瑶;刘备;王芳;李续娥 | 申请（专利权）人： | 华南师范大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/30;A61K38/02;A61P37/06;A61P7/06;A23L33/185;A23L2/66;A21D2/26;A21D13/064 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 郭炜绵 |
| 地址： | 510631 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胡芦巴 蛋白 及其 分离 提取 方法 制备 骨髓 hsc 清除 辅助剂 中的 应用 | ||
1.胡芦巴蛋白在制备骨髓HSC清除辅助剂中的应用，其特征在于：
所述胡芦巴蛋白的分离提取方法包括以下步骤：
（1）将胡芦巴粉碎，先用石油醚浸泡脱脂，然后加入KH2PO4-NaOH缓冲液搅拌浸提4-12h，离心，取上清液；重复上述浸提操作若干次，合并所得的上清液，为提取液；
（2）向提取液中缓慢加入硫酸铵至40%的饱和度，离心，收集上清液；继续加入硫酸铵至70%的饱和度，离心，收集沉淀；
（3）将沉淀转移至透析袋中，在去离子水中透析，至透析液无色为止，最后将透析袋中的成分冷冻干燥，得到胡芦巴蛋白。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述步骤（2）为：向提取液中缓慢加入硫酸铵至50%的饱和度，离心，收集上清液；继续加入硫酸铵至60%的饱和度，离心，收集沉淀。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的石油醚浸泡脱脂，是用石油醚密闭浸泡胡芦巴粉末2-4小时，过滤，粉末风干，滤液回收。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的KH2PO4-NaOH缓冲液，其中KH2PO4的浓度为40mmol/L，pH值为6.5-8.0。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的离心，是1500-3500r/min，离心10-15min。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的透析，平均每隔12h换一次水。
7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述方法在4-10℃下进行。
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