[发明专利]一种神经元特异性烯醇化酶的冻干方法

权利要求书

1.一种神经元特异性烯醇化酶的冻干方法，包括以下步骤：取缓冲液将NSE溶解，制成NSE试剂，放入真空冷冻干燥机内进行冻干；

所述缓冲液由以下组分制成：三羟甲基氨基甲烷、氯化钾、十二水磷酸氢二钠、硫酸镁、海藻糖、牛血清白蛋白和纯化水；其中，按照重量份数计，三羟甲基氨基甲烷4-20份、氯化钾6-25份、十二水磷酸氢二钠1-6份、硫酸镁0.1-10份、海藻糖5.0-50份、牛血清白蛋白1.0-50份；所述缓冲液的pH值在6.8～8.5之间；

所述冻干方法，包括以下步骤：将真空冷冻干燥机设置成三个阶段，分别为预冷冻段、升华干燥段、解析干燥段；冻干后，在4-8℃环境下保存；

其中，所述预冷冻段为：将NSE试剂从常温降温至0℃；降温时间为30分钟；

在0℃保温10分钟后，再降温至-30℃，降温时间为30分钟；

在-30℃保温60分钟后，再降温至-55℃，降温时间为30分钟；在-55℃保温240分钟；

所述升华干燥段为：将真空度在1-5分钟内降至0-5帕斯卡；设置7个温度点，分别为-50℃、-45℃、-35℃、-30℃、-25℃、-15℃、-5℃；

-55℃到-50℃的升温时间为10分钟、在-50℃的保温时间为60分钟；

-50℃到-45℃的升温时间为60分钟、在-45℃的保温时间为120分钟；

-45℃到-35℃的升温时间为60分钟、在-35℃的保温时间为240分钟；

-35℃到-30℃的升温时间为60分钟、在-30℃的保温时间为480分钟；

-30℃到-25℃的升温时间为60分钟、在-25℃的保温时间为240分钟；

-25℃到-15℃的升温时间为60分钟、在-15℃的保温时间为120分钟；

-15℃到-5℃的升温时间为30分钟、在-5℃的保温时间为60分钟；

所述解析干燥段为：设置两个温度点，分别为20℃、25℃；

-5℃到20℃的升温时间为120分钟、在20℃的保温时间为60分钟；

20℃到25℃的升温时间为15分钟、在25℃的保温时间为460-620分钟。

2.如权利要求1所述的冻干方法，其特征在于，按照重量份数计，三羟甲基氨基甲烷4.2-15.6份、氯化钾8.5-24份、十二水磷酸氢二钠1.2-5.8份、硫酸镁0.1-10份、海藻糖5.0-50份、牛血清白蛋白1.0-50份。

3.如权利要求1所述的冻干方法，其特征在于，所述缓冲液的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取三羟甲基氨基甲烷、氯化钾、十二水磷酸氢二钠、硫酸镁、海藻糖、牛血清白蛋白，加入到纯化水中搅拌至完全溶解，调节pH值，定容；

(2)用滤膜进行过滤，即可。

4.如权利要求3所述的冻干方法，其特征在于，所述滤膜的孔径为0.22μm。

5.如权利要求1所述的冻干方法，其特征在于，所述NSE试剂由NSE抗原和缓冲液配制而成，用于标准品、质控品或参考品。