[发明专利]一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法

权利要求书

1.一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法，其特征在于，包括以下步骤；

(1)按照标准采样方法采集水环境中的低毒性水样，过滤水样，去除悬浮颗粒，盛于锥形瓶内，然后用稀硫酸调节水样pH，得到预处理样品；采用有机溶剂和超纯水依次活化HLB固相萃取小柱，得到活化后的HLB小柱；

(2)利用固相萃取装置对步骤(1)中得到的预处理样品在步骤(1)中得到的活化后HLB小柱进行上样；上样结束后，再用超纯水对上样结束后的HLB小柱进行清洗，并抽真空以排除小柱内的水分，采用有机溶剂洗脱HLB小柱上富集的有机物，收集洗脱液，利用氮吹仪，调节水浴温度，采用高纯氮气将洗脱液吹至一定体积，得到样品浓缩液；

(3)取步骤(2)中得到的样品浓缩液40μL于白色96孔板中，设置三个平行样，并使甲醇充分挥发，消除其对后续生物毒性测试的影响，待甲醇挥发后，加入后续生物毒性测试使用的溶液，充分再溶解污染物。

2.根据权利要求1所述的一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法，其特征在于，所述步骤(1)中，采用0.7μm玻璃纤维素膜过滤水样，将盛于锥形瓶内过滤后的溶液通过稀硫酸将水样pH调至2～3。

3.根据权利要求1所述的一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法，其特征在于，所述步骤(1)中，选用的固相萃取柱为HLB固相萃取小柱，采用10mL色谱级甲醇溶液和10mL超纯水活化小柱。

4.根据权利要求1所述的一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中调节固相萃取装置的真空泵压力使得水样以2-3mL/min速度上样。

5.根据权利要求1所述的一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中，再用10mL超纯水对小柱进行清洗，并抽真空30min以排除小柱内的水分，采用10mL色谱级甲醇溶液洗脱富集的污染物，收集洗脱液，利用氮吹仪，调节水浴温度为40℃，采用高纯氮气将洗脱液吹至1mL。

6.根据权利要求1所述的一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法，其特征在于，所述步骤(3)中，加入样品浓缩液的96孔板采用具有恒温加热功能的微孔板振荡器挥发样品中的甲醇。

7.根据权利要求1所述的一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法，其特征在于，所述步骤(3)中，甲醇的挥发操作过程具体参数为：加热温度为40℃，震荡速度为500rpm，挥发时间为1h。

8.根据权利要求1所述的一种低毒性样品生物毒性检测的快速简便预处理方法，其特征在于，所述步骤(3)中，再溶解污染物的具体参数为：加热温度为40℃，震荡速度为500rpm，时间为1h。