[发明专利]一种抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体及其制备方法有效
| 申请号： | 202110385641.3 | 申请日： | 2021-04-10 |
| 公开（公告）号： | CN112940112B | 公开（公告）日： | 2023-10-17 |
| 发明（设计）人： | 王锦祥;谢喜平;孙世坤;陈岩锋;陈冬金;桑雷 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C07K16/12 | 分类号： | C07K16/12;C07K16/02;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;A61K39/40;A61P31/04 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350013 福建省福州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 型多杀性巴氏 杆菌 卵黄 抗体 及其 制备 方法 | ||
1.一种抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）利用兔D型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗免疫健康产蛋母鸡，获得免疫鸡蛋；
（2）取免疫鸡蛋蛋黄，除去蛋黄膜并搅匀蛋黄；
（3）向蛋黄中加入灭菌双蒸水，搅拌均匀成为蛋黄液，调节蛋黄液的pH值除去脂质，再加入硫酸铵沉淀卵黄抗体；
（4）将步骤（3）所得产物透析、灭活和过滤，得到卵黄抗体。
2.根据权利要求1所述的抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体的制备方法，其特征在于，所述兔D型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗由多杀性巴氏杆菌PmD01株制备，该菌株于2021年3月3日于中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为：CCTCC NO：M 2021201。
3.根据权利要求1所述的抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）兔D型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗抗原含量为2.0×1010--1.0×1011 CFU/mL。
4.根据权利要求1所述的抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）灭菌双蒸水的体积为蛋黄体积的9倍。
5.根据权利要求1所述的抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）调节蛋黄液的pH值至5.1。
6.根据权利要求1所述的抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中硫酸铵沉淀方法为：先加入终浓度为50%（W/V）的硫酸铵，离心，弃上清，沉淀用蛋黄液等体积的灭菌双蒸水溶解；再加入终浓度为33%（W/V）的硫酸铵，离心，弃上清，沉淀用1/10蛋黄液体积的灭菌生理盐水溶解。
7.根据权利要求1所述的抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）将步骤（3）所得产物转移入分子截留量为14KD的透析袋透析，加入体积终浓度为0.1%的甲醛4℃灭活24小时，再经0.45 μm无菌滤器过滤，得到卵黄抗体。
8.一种如权利要求1-7任一所述方法制备获得的抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体。
9.如权利要求8所述的抗兔D型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体在兔养殖过程中的应用。
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