[发明专利]TERT基因启动子突变实时荧光定量PCR检测试剂及方法

权利要求书

1.TERT基因启动子突变实时荧光定量PCR检测试剂，其特征在于包括引物和探针；

所述引物包括序列如SEQ ID No.1所示的正向引物和序列如SEQ ID No.2所示的反向引物；SEQ ID No.1为5’-tcctgccccttcaccttc-3’；SEQ ID No.2为5’-aaggaaggggaggggct-3’；

所述探针包括序列如SEQ ID No.3所示的C250T位点野生型探针、序列如SEQ ID No.4所示的C250T位点突变型探针、序列如SEQ ID No.5所示的C228T位点野生型探针和序列如SEQ ID No.6所示的C228T位点突变型探针；SEQ ID No.3为5’-ccgacccctcccg-3’；SEQ IDNo.4为5’-ccgaccccttccg-3’；SEQ ID No.5为5’-ccagccccctccg-3’；SEQ ID No.6为5’-ccagccccttccg-3’；

所述C250T位点野生型探针和所述C228T位点野生型探针的5’端标记有FAM荧光基团，所述C250T位点野生型探针和所述C228T位点野生型探针的3’端标记有MGB淬灭基团；所述C250T位点突变型探针和所述C228T位点突变型探针的5’端标记有VIC荧光基团，所述C250T位点突变型探针和所述C228T位点突变型探针的3’端标记有MGB淬灭基团。

2.根据权利要求1所述的TERT基因启动子突变实时荧光定量PCR检测试剂，其特征在于还包括dNTP、DNA聚合酶、PCR反应缓冲液和ddH₂O，PCR反应缓冲液包含Mg²⁺离子。

3.TERT基因启动子突变实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤1：在反应容器中加入权利要求1或2所述的TERT基因启动子突变实时荧光定量PCR检测试剂和待检测的DNA，进行扩增反应和实时荧光检测；

步骤2：根据扩增曲线判断突变情况。

4.根据权利要求3所述的TERT基因启动子突变实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于：

在所述步骤2中，根据扩增曲线获得Ct值，根据所述Ct值判断突变情况。