[发明专利]阪崎肠杆菌的荧光定量PCR检测试剂盒、检测方法及其应用有效
| 申请号： | 202110390399.9 | 申请日： | 2021-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN113136441B | 公开（公告）日： | 2022-05-13 |
| 发明（设计）人： | 滕宝;杨若松;李爽;卢雁;杨文敏;郭鹏;陈银辉;于力涛;唐晓娜 | 申请（专利权）人： | 中海生物技术（枣庄)有限公司;黑龙江省绿色食品科学研究院;北京中海生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/10;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 | 代理人： | 郝亮 |
| 地址： | 277103 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 阪崎肠 杆菌 荧光 定量 pcr 检测 试剂盒 方法 及其 应用 | ||
1.一种用于检测阪崎肠杆菌的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有PCR扩增试剂、对照品和参考品，所述PCR扩增试剂中含有用于检测阪崎肠杆菌的引物和探针，所述引物的序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:2所示，所述探针序列如SEQ ID NO:3所示。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述探针的 5’端连接有荧光报告基团，3’端连接有荧光淬灭基团，荧光报告基团选自FAM，荧光淬灭基团选自BHQ1。
3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述PCR扩增试剂中探针的浓度为200 ~ 300 nM，引物的浓度为400 ~ 800 nM。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，阳性对照为序列如SEQ ID NO:10所示阳性目的基因片段；
阴性对照为无核酸酶水。
5.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述参考品包括：
参考品1：含有3.62×104 copies/µL的阳性目的基因片段；
参考品2：含有3.62×103copies/µL的阳性目的基因片段；
参考品3：含有3.62×102 copies/µL的阳性目的基因片段；
参考品4：含有3.62×101 copies/µL的阳性目的基因片段；
参考品5：含有3.62×100 copies/µL的阳性目的基因片段；
所述阳性目的基因的序列如SEQ ID NO:10所示。
6.如权利要求1~5任一项所述的检测试剂盒在食品质量安全控制中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，所述食品选自婴儿食品。
8.根据权利要求6所述的应用，所述食品选自婴儿奶粉。
9.一种用于检测阪崎肠杆菌的引物和探针，所述引物的序列如SEQ ID NO:1~SEQ IDNO:2所示，所述探针序列如SEQ ID NO:3所示。
10.根据权利要求9所述的用于检测阪崎肠杆菌的引物和探针，其特征在于，所述探针的5’端连接有荧光报告基团FAM，3’端连接有荧光淬灭基团BHQ1。
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