[发明专利]一种降钙素原的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种降钙素原的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法。属于免疫检测分析技术领域。试剂盒包括：磁微粒试剂、PCT校准品、PCT质控品和PCT抗试剂。本发明将化学发光法与免疫磁微粒相结合，提供了一种接近均相的反应体系，与现有技术相比，具有更高的检测灵敏度和特异性，并达到了较佳的性能参数。

技术领域

本发明涉及免疫检测分析技术领域，更具体的说是涉及一种降钙素原的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法。

背景技术

在临床上脓毒症患者的PCT水平明显高于非脓毒症患者，细菌性脓毒症患者的降钙素原即PCT水平显著高于非细菌性脓毒症。与IL-2，IL-6，IL-8，CRP和TNF-α相比，PCT对脓毒症患者的全身炎症反应综合征(SIRS)患者的敏感性最高(85％)和特异性(91％)最高，因此可以作为诊断脓毒症和鉴别严重细菌感染的生物标志物。如果怀疑脓毒症，建议立刻检查PCT。目前PCT诊断脓毒症的界值水平为0.5ng/mL。

PCT在SIRS、脓毒症、严重脓毒症和脓毒性休克患者的质量浓度依次增高，并且有统计学差异，与病情的严重程度呈正相关。动态监测PCT水平的变化趋势可以判断病情进展情况。PCT持续升高提示感染加重或治疗失败，PCT降低可以视为感染好转和治疗成功。

治疗后PCT水平迅速下降通常提示预后良好，而PCT维持元水平或升高则预示不良。初始PCT水平绝对值的预后意义有限，即使初始的PCT水平非常高，经过正确的治疗后PCT迅速下降，预后也较好。因而PCT的变化趋势对于预后的判断更为重要。

不同的研究证实，PCT的比例临床信息能够进一步明确抗生素治疗的必要性和优化抗生素疗程。通过每日监测PCT作为使用抗生素的指征可使抗生素治疗的疗程缩短，从而减少了不必要的抗生素使用，使耐药率和不良反应发生率降低

因此，如何提供一种降钙素原的检测试剂和检测方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种降钙素原的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒及其检测方法。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种降钙素原的磁微粒化学发光免疫分析试剂盒，包括：磁微粒试剂、PCT校准品、PCT质控品和PCT抗试剂。

优选的：磁微粒试剂为连接有羊抗FITC抗体的磁微粒溶液，制备方法为：

1)将羧基磁珠溶液在磁微粒缓冲液的作用下进行分散处理，得到分散的羧基磁珠溶液；

2)将分散的羧基磁珠溶液和羊抗FITC抗体进行连接反应，得到连接产物；

3)将连接产物置于磁场中，用磁微粒缓冲液冲洗，制得连接有羊抗FITC抗体的磁微粒溶液。

优选的：步骤1)中分散处理：将羧基磁珠浓缩液置于磁场内15～20min，待羧基磁珠全部沉降后除去上层清液，加入磁微粒缓冲液振荡后，置于磁场中15～20min后，除去上层清液；

振荡时间均为20～30min；

羧基磁珠和磁微粒缓冲液的体积比为1:(2～5)；

分散处理为3次；

步骤2)中，分散的羧基磁珠溶液和羊抗FITC抗体的质量比为100:5～100：1；

分散的羧基磁珠溶液的浓度为10～50mg/mL；

连接反应的温度为2～8℃，连接反应的时间为16～20h；

步骤3)中，置于磁场的时间为13～17min；

冲洗的次数为3次；