[发明专利]一种通过发酵法用黄芩苷制备黄芩素的方法

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种通过发酵法用黄芩苷制备黄芩素的方法，经过分别活化、分别进行种子培养、发酵培养、黄芩素分离纯化最终得到黄芩素。通过马克斯克鲁维酵母菌和扁平云假丝酵母(Candida humilis)YS023A菌共同发酵法用黄芩苷制备黄芩素，提高了黄芩素的收率，安全、无污染、操作方便、得到的黄芩素纯度高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种通过发酵法用黄芩苷制备黄芩素的方法。

背景技术

黄芩为唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根，具有消热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功能，可用于治疗上呼吸道感染、泌尿系统感染、肝炎、高血压等，也可广泛用于保健食品。

黄芩苷和黄芩素为中药黄芩的主要活性成分。黄芩苷经口服后，在消化系统内被肠道菌群转化为苷元才能被吸收利用( Lai,et al.,2003 )，因此，黄芩苷的生物利用率较低，而黄芩素容易被吸收，生物利用度高(赵晶等，1998 )。此外，黄芩素的药理活性也远高于黄芩苷，尤其是清除自由基及抗氧化( Gao ,et al .，1999 )、抗艾滋病毒( Wu ,ea al.,2001 )、抗血管生成( Liu ,et al .，2003 )作用等方面。因此人们致力于研究将黄芩苷变成黄芩素。

目前，利用黄芩苷生成黄芩素主要有两种方法，即化学方法和生物转化方法。化学方法通过酸、碱作用，水解去掉黄芩苷的糖基，从而生成黄芩素。但是，由于这种方法要用到大量的酸、碱、有机溶剂试剂，对环境污染较为严重。而且强酸、强碱对黄芩苷和黄芩素结构也会产生一定的破坏作用，从而导致黄芩素的最终得率下降。随着生物技术的发展，酶作为催化剂有专一性好且反应条件温和等优点，在工业应用上也正在越来越多地替代传统意义上的催化剂。由于黄芩苷是β-葡萄糖醛酸酶或β-葡萄糖苷酶的抑制剂，因此一般的β-葡萄糖苷酶或β-葡萄糖醛酸酶不能很好地水解黄芩苷，转化率较低。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述不足，提供一种通过发酵法用黄芩苷制备黄芩素的方法。通过马克斯克鲁维酵母菌和扁平云假丝酵母(Candida humilis)YS023A菌共同发酵法用黄芩苷制备黄芩素，安全、无污染、操作方便、得到的黄芩素收率高、纯度高。本发明首次利用复合菌共同发酵制备黄芩素，提供了新的合成思路，对黄芩素的制备具有重要的指导意义。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一方面，本发明提供了一种通过发酵法用黄芩苷制备黄芩素的方法，包括：通过马克斯克鲁维酵母菌和扁平云假丝酵母(Candida humilis)YS023A菌共同发酵法用黄芩苷制备黄芩素；所述马克斯克鲁维酵母菌的保藏编号为CGMCC No.13907；所述扁平云假丝酵母(Candida humilis)YS023A菌的保藏编号为CGMCC No.17257；

所述方法包括如下步骤：

S1分别活化：

将所述马克斯克鲁维酵母菌和所述扁平云假丝酵母(Candida humilis)YS023A菌分别在基础培养基上进行活化；

S2分别进行种子培养：

从活化的所述马克斯克鲁维酵母菌中蘸取菌种，接种到基础培养基中，进行恒温振荡培养，得到第一种子液；

从活化的所述扁平云假丝酵母(Candida humilis)YS023A菌中蘸取菌种，接种到基础培养基中，进行恒温振荡培养，得到第二种子液；

S3发酵培养：

将接种量为5%~10%的马克斯克鲁维酵母菌和接种量为1%~5%的扁平云假丝酵母(Candida humilis)YS023A菌接种到发酵培养基中，进行恒温振荡培养，得到发酵液；

S4黄芩素分离纯化：