[发明专利]一种斑玉蕈液体菌种的制备方法

说明书

本发明公开了一种斑玉蕈液体菌种的制备方法，发酵培养基制作过程中，配料A和配料B依次加入，有利于制作均匀、无结块的发酵培养基。发酵完成后，液体菌种分散性好，菌丝活力强；工艺简单成熟，适用于斑玉蕈多个品种的液体菌种生产，具有良好的稳定性。

技术领域

本发明属于技术领域，具体涉及一种斑玉蕈液体菌种的制备方法。

背景技术

斑玉蕈（Hypsizygus marmoreus）又名玉蕈，真姬菇等，隶属于担子菌门、伞菌纲、伞菌目、离褶伞科、玉蕈属。斑玉蕈具有灰色和白色两个品系，分别称为蟹味菇和白玉菇，其形态优美，味道鲜且营养丰富，是一种著名的食药兼用菌。

斑玉蕈工厂化栽培周期一般为120-130天，期间易受到栽培环境和病虫害的影响，导致生产成本高、品质不稳定等现象，限制了斑玉蕈工厂化栽培的进一步发展和推广。

菌种制备技术是食用菌工厂化栽培的核心技术之一。目前常用的菌种有两种形式，分别是固体菌种和液体菌种。固体菌种生产技术成熟，子实体产量稳定，缺点是用工量大，菌包污染率高。与固体菌种相比，液体菌种具有无可比拟的优势，如用工量少，菌包污染率低，出菇整齐等。制备液体菌种一般分为三个步骤，分别是母种制作，种子液制备以及发酵罐菌种制备等。获得无污染、菌丝球分布均匀且活力高的菌种是液体菌种制备的最终目标，通过调整发酵培养基成分和发酵工艺，能够获得理想的液体菌种，满足工厂化栽培的需要。

随着斑玉蕈市场需求的增加，越来越多的工厂开始采用液体菌种。通过开发液体菌种，可有效降低企业的人力成本，提高企业的经济效益，从而进一步提高企业的竞争力，推动食用菌产业的转型升级。

发明内容

本发明的目的是为了开发液体菌种, 有效降低企业的人力成本，提出一种斑玉蕈液体菌种的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种斑玉蕈液体菌种的制备方法，其特征在于：具体的方法步骤如下：

培养基的前期准备：包括PDA培养基制备，种子培养基制备，发酵培养基；

液体菌种生产过程：

（1）从4℃冰箱中取出斑玉蕈试管种，利用接种钩，取直径为0.5～0.6 厘米菌块置于PDA平板培养基中，23～24℃培养10～12天；

（2）利用打孔器，从PDA培养基的菌落边缘处取6～8块、直径为0.8～1.0 厘米菌块接种于600毫升种子培养基中，23～24℃摇床震荡培养6～7天，转速140～160转/分钟；培养期间，观察种子培养液是否有浑浊、大量气泡、菌液发白或有漂浮物等现象发生，这表明种子液可能受到杂菌污染，污染的种子液及时灭菌处理；

（3）取未污染的种子液，放置于磁力搅拌器上通电搅拌16～24小时，此为种子液；此操作可以将成团的菌丝球打碎，一是接种发酵罐时，不会堵塞接种口，提高接种效率；二是接种发酵培养基后，菌丝体分散均匀，易萌发；

（4）将抽滤嘴插入发酵罐的接种口，将种子液倒入发酵罐中，接种量1%；调节培养温度23～24℃，通入净化空气进行培养，培养时间6～7天，获得液体菌种。

进一步的，PDA培养基制作过程： 称取200克土豆并切成薄片，然后加入1000毫升水，煮沸20分钟；待冷却后取纱布过滤，滤液中加入20克葡萄糖和15克琼脂，再次加热至完全融化，补足水至1000毫升；将PDA培养基分装至500毫升三角瓶中，每瓶250-300毫升，121℃灭菌30分钟；待培养基冷却至50～60℃时，无菌环境下倒平板，每个平板30～35毫升。