[发明专利]一种人羊膜间充质干细胞悬液的制备与应用

权利要求书

1.一种人羊膜间充质干细胞悬液，其特征在于，所述人羊膜间充质干细胞悬液是由人羊膜间充质干细胞混悬于PBS溶液中制得，悬液中的人羊膜间充质干细胞密度为5×10⁶个/ml。

2.根据权利要求1所述的人羊膜间充质干细胞，其特征在于，所述人羊膜间充质干细胞是由人羊膜组织经过分离与传代培养制得的。

3.根据权利要求2所述的人羊膜间充质干细胞，其特征在于，所述人羊膜组织是由正常足月剖腹产胎儿的胎盘脐带面钝性分离，经D-Hank’s液充分冲洗后将羊膜剪碎为制得的。

4.根据权利要求2所述的人羊膜间充质干细胞，其特征在于，其分离过程为：将人羊膜组织用含有0.02％EDTA的0.05％胰蛋白酶，于37℃下消化2次，每次40min，弃去消化液后再加入含有0.075mg/mLDNaseI的0.75mg/mLII型胶原酶消化液，37℃，200r/min旋转消化约40min至组织基本消化完全，用300目钢网过滤，收集细胞滤液，1500r/min离心10min，弃上清，得到人羊膜间充质干细胞。

5.根据权利要求2所述的人羊膜间充质干细胞，其特征在于，培养所述人羊膜间充质干细胞的培养液为含有5～10％人脐带血血清的LG-DMEM培养基，接种细胞密度为5×10⁵/mL。

6.根据权利要求3所述的人羊膜间充质干细胞，其特征在于，所述人羊膜间充质干细胞是经过传代培养后得到的第3～5代人羊膜间充质干细胞，90％以上细胞胞浆表达波形蛋白阳性，且表面标志CD44、CD73、CD105阳性表达，CD34、CD45与HLA-DR阴性表达。

7.根据权利要求1所述的人羊膜间充质干细胞悬液在心脏移植患者中的应用方法，其特征在于：采取腹腔注射的方式给药。