[发明专利]通过血清HIV-1抗体检测快速区分HIV近期和长期感染状态的试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种快速区分HIV近期和长期感染状态的试纸条，包括底板、设置于底板上的样品垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述硝酸纤维素膜的两端分别搭接所述样品垫和吸水纸，所述样品垫的靠近硝酸纤维素膜的一端喷涂有胶体金标记的鼠抗人IgG抗体而形成金标层；其特征在于：

所述硝酸纤维素膜上设有混合包被GP41重组抗原BE23和GP41重组抗原BE33的第一检测线,单独包被HIV重组抗原(英科新创(厦门)科技股份有限公司,货号：XM1008HIV-A)的第二检测线和羊抗鼠IgG抗体的质控线。

2.根据权利要求1所述的快速区分HIV近期和长期感染状态的试纸条，其特征在于：第二检测线的HIV重组抗原的包被浓度为2.5-3.5mg/ml。

3.根据权利要求2所述的快速区分HIV近期和长期感染状态的试纸条，其特征在于：第一检测线中的GP41重组抗原BE23的包被浓度为0.1-0.3mg/ml，第一检测线中的GP41重组抗原BE33的包被浓度为0.3-0.6mg/ml。

4.根据权利要求3所述的快速区分HIV近期和长期感染状态的试纸条，其特征在于：GP41重组抗原BE23、GP41重组抗原BE33两者以体积比为1：3混合包被。

5.根据权利要求1至4任意一项所述的快速区分HIV近期和长期感染状态的试纸条，其特征在于：质控线的羊抗鼠IgG的包被浓度为0.5-1.0mg/ml。

6.根据权利要求5所述的快速区分HIV近期和长期感染状态的试纸条，其特征在于：所述胶体金标记的鼠抗人IgG抗体的浓度为10-20μg/ml。

7.根据权利要求6所述的快速区分HIV近期和长期感染状态的试纸条，其特征在于：参照比色卡，在质控线、第二检测线都出现条带时参考第一检测线，当第一检测线条带亮度小于L3时显示近期感染的结果，当第一检测线条带大于等于L3显示为长期感染的结果。

8.混合包被GP41重组抗原BE23和GP41重组抗原BE33的第一检测线在如权利要求1至7任意一项所述的快速区分HIV近期和长期感染状态检测试纸方面的用途。

9.一种如权利要1至7任意一项所述的快速区分HIV近期和长期感染状态检测试纸的制备方法，其特征在于：通过如下步骤进行，

1)准备好样品垫；

2)将鼠抗人IgG与胶体金颗粒结合形成胶体金标记鼠抗人IgG抗体，均匀涂于金标垫上，42ml/张，45℃冻干，待用；

3)制备第一检测线、第二检测线和质控线，然后整体在25℃、湿度10～30％的条件下，晾干或烘干处理18-22h；

制备第一检测线的具体过程是：将GP41重组抗原BE23、GP41重组抗原BE33重组抗原用缓冲液分别稀释为0.1-0.3mg/ml、0.3-0.6mg/ml，混合后，将混合液用喷膜机在硝酸纤维素膜划线形成第一检测线；

制备第二检测线的具体过程是：将HIV-1重组抗原用包被缓冲液稀释至2.5-3.5mg/ml，用喷膜机在硝酸纤维素膜划线形成第二检测线；

制备质控线的具体过程是：将羊抗鼠抗体稀释至0.5-1.0mg/ml，用喷膜机在硝酸纤维素膜划线形成质控线；

4)将样品垫、硝酸纤维素膜和吸水纸顺次搭接在底板上获得完整试纸条。