[发明专利]一种单抗N-糖糖型的检测方法有效

专利信息
申请号: 202110407676.2 申请日: 2021-04-15
公开(公告)号: CN113109477B 公开(公告)日: 2022-05-27
发明(设计)人: 李杰;蒋露;舒占永;赵雪娜;陶佳林;王永忠 申请(专利权)人: 苏州药明生物技术有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/64
代理公司: 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 代理人: 尉月丽
地址: 215123 江苏省苏州市苏州工*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 糖糖型 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种单抗N-糖糖型检测的前处理方法,其特征在于,利用置换缓冲液将样品进行换液处理后,再加入内切酶进行酶切脱糖;

所述置换缓冲液为柠檬酸溶液;

所述柠檬酸溶液的浓度为15-25mmol/L,pH为6.3-6.7;

所述样品为IgG1类抗体;

所述前处理方法,具体包括以下步骤:

(1)向样品中加入置换缓冲液进行换液,经离心后,收集样品;

(2)向收集的样品中加入置换缓冲液,混匀,得到蛋白液;

(3)向得到的蛋白液中加入内切酶,水浴孵育。

2.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述内切酶为PNGase F酶。

3.一种单抗N-糖糖型的检测方法,其特征在于,采用权利要求1-2任一项所述的前处理方法对样品进行前处理。

4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,对样品进行前处理后,再进行寡糖回收、寡糖标记、复溶和液相色谱检测。

5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,所述寡糖标记中采用的标记试剂为2-AB。

6.根据权利要求4-5任一项所述的检测方法,其特征在于,所述复溶采用的溶剂为超纯水。

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