[发明专利]一种单抗N-糖糖型的检测方法有效
申请号: | 202110407676.2 | 申请日: | 2021-04-15 |
公开(公告)号: | CN113109477B | 公开(公告)日: | 2022-05-27 |
发明(设计)人: | 李杰;蒋露;舒占永;赵雪娜;陶佳林;王永忠 | 申请(专利权)人: | 苏州药明生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/64 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 尉月丽 |
地址: | 215123 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 糖糖型 检测 方法 | ||
1.一种单抗N-糖糖型检测的前处理方法,其特征在于,利用置换缓冲液将样品进行换液处理后,再加入内切酶进行酶切脱糖;
所述置换缓冲液为柠檬酸溶液;
所述柠檬酸溶液的浓度为15-25mmol/L,pH为6.3-6.7;
所述样品为IgG1类抗体;
所述前处理方法,具体包括以下步骤:
(1)向样品中加入置换缓冲液进行换液,经离心后,收集样品;
(2)向收集的样品中加入置换缓冲液,混匀,得到蛋白液;
(3)向得到的蛋白液中加入内切酶,水浴孵育。
2.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述内切酶为PNGase F酶。
3.一种单抗N-糖糖型的检测方法,其特征在于,采用权利要求1-2任一项所述的前处理方法对样品进行前处理。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,对样品进行前处理后,再进行寡糖回收、寡糖标记、复溶和液相色谱检测。
5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,所述寡糖标记中采用的标记试剂为2-AB。
6.根据权利要求4-5任一项所述的检测方法,其特征在于,所述复溶采用的溶剂为超纯水。
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