[发明专利]一种高效合成乳铁蛋白的毕赤酵母及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 202110415407.0 | 申请日： | 2021-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN112940955B | 公开（公告）日： | 2022-10-18 |
| 发明（设计）人： | 刘龙;陈坚;吕雪芹;堵国成;李江华;刘延峰;崔世修 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/67;C12N15/31;C12N15/12;C12P21/02;C12R1/84 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高效 合成 铁蛋白 酵母 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种高效合成乳铁蛋白的毕赤酵母，其特征在于，所述的毕赤酵母强化表达了宿主中的分子伴侣HSP70、Ydj1、GrpE中的一种和BiP、Sec61a中的一种，所述的宿主异源表达了人源乳铁蛋白；
所述的分子伴侣HSP70的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，Ydj1的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示，GrpE 的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，BiP的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，Sec61a的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；
分子伴侣HSP70、Ydj1、GrpE采用启动子FLD1进行增强表达；
分子伴侣BiP、Sec61a采用启动子GAP进行增强表达；
所述的宿主为异源表达了人源乳铁蛋白的毕赤酵母GS115。
2.根据权利要求1所述的毕赤酵母，其特征在于，所述的乳铁蛋白的核苷酸序列如SEQID NO.6所示。
3.一种权利要求1~2任一项所述的毕赤酵母的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、分别构建分子伴侣HSP70、Ydj1、GrpE中的一种和BiP、Sec61a中的一种的启动子表达分子伴侣的表达框；
S2、将S1步骤构建的表达框转化到异源表达了人源乳铁蛋白的宿主中，筛选得到重组毕赤酵母。
4.权利要求1~2任一项所述的毕赤酵母在发酵生产乳铁蛋白中的应用。
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