[发明专利]采用双启动子增强乳铁蛋白表达的毕赤酵母及其应用在审
| 申请号： | 202110415416.X | 申请日： | 2021-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN112940956A | 公开（公告）日： | 2021-06-11 |
| 发明（设计）人： | 刘龙;陈坚;吕雪芹;堵国成;李江华;刘延峰;崔世修 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/67;C12N15/12;C12P21/02;C12R1/84 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 采用 启动子 增强 铁蛋白 表达 酵母 及其 应用 | ||
1.一种采用双启动子增强乳铁蛋白表达的毕赤酵母，其特征在于，所述的毕赤酵母以启动子Paox1和启动子Pgap串联启动乳铁蛋白基因的表达。
2.根据权利要求1所述的毕赤酵母，其特征在于，所述的启动子Paox1在启动子Pgap的上游。
3.根据权利要求1所述的毕赤酵母，其特征在于，所述的启动子Paox1和启动子Pgap之间设有25～75bp的间隔序列。
4.根据权利要求1所述的毕赤酵母，其特征在于，所述的间隔序列的长度为50bp，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.根据权利要求1所述的毕赤酵母，其特征在于，所述的毕赤酵母的宿主为毕赤酵母GS115。
6.根据权利要求1所述的毕赤酵母，其特征在于，所述的乳铁蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
7.一种权利要求1～6任一项所述的毕赤酵母的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、将Pgap启动子整合在采用启动子Paox1表达乳铁蛋白的质粒上，得到重组质粒；
S2、将重组质粒转化到毕赤酵母宿主中，得到重组毕赤酵母。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在S1步骤中，将所述的Pgap启动子整合在启动子Paox1的下游。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在S1步骤中，还包括在启动子Paox1和启动子Pgap之间插入25～75bp的随机间隔序列。
10.权利要求1～6任一项所述的毕赤酵母在发酵生产乳铁蛋白中的应用。
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