[发明专利]一种热处理大豆分离蛋白基共价复合物及其在荷载姜黄素中的应用

说明书

本发明公开了一种热处理大豆分离蛋白基共价复合物及其制法和在荷载姜黄素中的应用，其制法包括以下步骤：将大豆分离蛋白溶液加热煮沸，离心取上清液；配制表没食子儿茶素‑3‑没食子酸酯溶液；将两种溶液以体积比为1∶1混合，搅拌反应24h以上，然后透析24h以上，将未结合的EGCG透析除去；透析袋中即为大豆分离蛋白‑EGCG共价复合物溶液。本发明所提供的大豆分离蛋白‑EGCG共价复合物对姜黄素的结合亲和力、荷载率均较高。本发明所提供的大豆分离蛋白‑EGCG共价复合物克服了单一大豆分离蛋白载体对热、酸的不稳定性，大大提高了运输体系的稳定性、缓释能力和抗氧化能力。

技术领域

本发明涉及一种热处理大豆分离蛋白基共价复合物及其制法和在荷载姜黄素中的应用。

背景技术

具有生理活性的物质，如姜黄素、白藜芦醇、植物甾醇、多不饱和脂肪酸和生物碱等，存在生物利用率低，稳定性差，易降解等缺陷，设计出有效的传输体系来提高其稳定性和生物效价具有很重要的意义。

基于大豆分离蛋白(SPI)去荷载这些活性成分的研究表明，蛋白载体在保护、运输生物功能成分和提高生物效价方面表现出很大的潜力和优势，然而，蛋白基载体也存在对环境胁迫力的不稳定性和生物功效的双效提升欠缺等缺陷，如蛋白基载体在高温下的变性，在酸性条件的沉降和酶解等，因此，如何提高蛋白基载体的稳定性和对生物活性物质协同功效的提升将是目前蛋白基载体的一个研究热点。

发明内容

针对现有大豆分离蛋白基输送载体存在不足，本发明的目的在于提供一种热处理大豆分离蛋白基共价复合物及其制法和在荷载姜黄素中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种大豆分离蛋白基共价复合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将大豆分离蛋白(SPI)溶于水，加热至沸腾，保持10-15min；停止加热后，再室温搅拌1-2h，离心，取上清液；通过稀释或浓缩，使上清液中蛋白含量为10-15mg/mL，调pH值至9.0-9.5；

步骤(1)所述的离心，优选10000rpm离心20min；

(2)配制浓度0.35-0.40mM的表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)溶液，调pH值至9.0-9.5；EGCG的分子量更大，抗氧化性更高，更易于与蛋白质进行共价结合；

(3)将两种溶液以体积比为1∶1混合，搅拌反应24h以上，然后透析24h以上，将未结合的EGCG透析除去；透析袋中即为大豆分离蛋白-EGCG共价复合物溶液；

步骤(3)所述透析袋的截留分子量为3500Da。

由上述方法制得的大豆分离蛋白-EGCG共价复合物可以应用在姜黄素的荷载中。

一种姜黄素荷载体系的制备方法，包含以下步骤：

调节大豆分离蛋白-EGCG共价复合物溶液的浓度为4.0-4.2mg/mL；用无水乙醇配制浓度2.0-2.2mg/mL的姜黄素溶液；将两者以体积比50∶1混合，搅拌反应2h以上，然后离心，上清液即为荷载姜黄素的大豆分离蛋白-EGCG复合体系；

所述的离心，优选在8000g，0-10℃的条件下离心20min。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

1、本发明所提供的HSPI-EGCG共价复合物，其制备方法无毒、无化学交联剂、简单可行、条件温和，且材料均为食品级。

2、本发明所提供的大豆分离蛋白-EGCG共价复合物对姜黄素的结合亲和力、荷载率均较高。

3、本发明所提供的大豆分离蛋白-EGCG共价复合物克服了单一大豆分离蛋白载体对热、酸的不稳定性，大大提高了运输体系的稳定性、缓释能力和抗氧化能力。