[发明专利]前列腺癌PDX模型构建方法在审
申请号: | 202110417721.2 | 申请日: | 2021-04-16 |
公开(公告)号: | CN113197156A | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
发明(设计)人: | 马仁强;严科池;王廷春 | 申请(专利权)人: | 广州博济医药生物技术股份有限公司 |
主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫 |
地址: | 510000 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 前列腺癌 pdx 模型 构建 方法 | ||
1.一种前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
将剪碎后的动物组织块与细胞比例为2×106-5×106个/mL的精囊腺细胞悬液混匀获得混合液,然后将混合液与基质胶混合移植至动物体内,再将肿瘤细胞溶液移植至动物体内进行传代。
2.如权利要求1所述的前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,所述精囊腺细胞悬液中的精囊腺细胞比例为2×106个/mL。
3.如权利要求1所述的前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,所述剪碎后的动物组织块的大小为10-30mm3。
4.如权利要求1所述的前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,所述剪碎后的动物组织块与精囊腺细胞悬液的体积为1:1。
5.如权利要求1所述的前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,所述将肿瘤细胞移植至动物体内进行传代的具体步骤为:获取肿瘤组织,冲洗切块,获得肿瘤组织块,在肿瘤组织块中加入组织冻存液获得肿瘤细胞溶液,颠倒混匀,冷藏及冷冻放置,然后将冷冻的肿瘤细胞溶液按照玻璃化复苏流程复苏及培养,最后将复苏后的肿瘤细胞溶液移植至动物体内进行传代。
6.如权利要求5所述的前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,肿瘤细胞溶液按照玻璃化复苏流程复苏后于35-38℃条件下震荡培养,震荡培养的转速为20-40r/min,震荡时间为20-40min。
7.如权利要求5所述的前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,所述颠倒混匀的时间为1-10min。
8.如权利要求5所述的前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,所述肿瘤细胞溶液颠倒混匀后,放置温度为2-8℃条件下冷藏10-30min。
9.如权利要求5所述的前列腺癌PDX模型构建方法,其特征在于,所述冷冻放置的时间为10-30min。
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