[发明专利]前列腺癌PDX模型构建方法

说明书

本发明涉及实验动物模型技术领域，具体公开了一种前列腺癌PDX模型构建方法。本发明构建方法包括以下步骤：将剪碎后的动物组织块与细胞比例为2×10⁶‑5×10⁶个/mL的精囊腺细胞悬液混匀获得混合液，然后将混合液与基质胶混合移植至动物体内，再将肿瘤细胞溶液移植至动物体内进行传代。本发明的构建方法获得的前列腺癌PDX模型与临床的前列腺癌具有较高的相似性，并且肿瘤细胞溶液移植后成瘤率高，保留了肿瘤组织原有的微环境，操作方法简单，成本较低，可以广泛应用于前列腺癌的个体化精准诊疗、抗癌新药临床前药物筛选和前列腺癌的研究。

技术领域

本发明涉及实验动物模型技术领域，尤其是涉及一种前列腺癌PDX模型构建方法。

背景技术

肿瘤是危害人类健康最严重的一类疾病，是导致人类死亡的最主要死因之一。根据世界卫生组织的数据统计显示，2008年全球肿瘤新发病例约为1270万，肿瘤死亡例数为760万。目前全球每年新增肿瘤患者约为900万人，预计到2025年全世界肿瘤发病率将比现在增加约60％，全球每年新增肿瘤患者人数将达到1500万人。我国肿瘤的发病率和死亡率居世界之首，每年死于肿瘤的人数超过160万，肿瘤发病率约为200/10万人，每年新发病例高达220万人，中国每4个死亡者中就有一个死于肿瘤，居死亡原因之首。前列腺癌是男性发病率较高的恶性肿瘤。在我国前列腺癌的发病率也位列于男性恶性肿瘤发病率的前列，而且近年来，发病率也有逐年上升的趋势。

PDX模型(Patient-derived Xenografting,PDX)是一种通过将手术切除的病人肿瘤组织接种于免疫缺陷鼠体内而建立的新一代人源肿瘤异种移植模型。这种模型保留了原代肿瘤的组织学、遗传学特征并维持了病人肿瘤的异质性，其药效学结果与临床具有极高的相关性。PDX模型可以广泛的应用于新药开发，尤其是靶点药物的临床试验病人筛选和预测性生物标志物的研究中。相对于传统的细胞系移植模型，PDX模型未经过体外培养，较好地保持了原发肿瘤的遗传特性和异质性，实验结果临床预见性更好，更能够反应临床病人的实际情况。PDX模型的优势在于可以完整再现了肿瘤病理学、肿瘤遗传学等特征。此外，PDX模型也可以用于准确筛选靶向和化疗药物制定最佳用药方案。用于药物治疗效果的实时监测，以及肿瘤耐药机制的研究等。

目前实体肿瘤动物模型的种类有限，还无法满足临床前的研究的需求，阻碍了临床疗效的预测和临床前的研究，因此有必要建立高效稳定的肿瘤PDX模型。为了克服前列腺癌临床研究和治疗中动物模型有限的困难，本发明构建了前列腺癌人源肿瘤异种移植模型。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种前列腺癌PDX模型构建方法，采用本发明的构建方法获得的前列腺癌PDX模型与临床的前列腺癌具有较高的相似性，并且肿瘤细胞溶液移植后成瘤率高，保留了肿瘤组织原有的微环境，操作方法简单，成本较低，可以广泛应用于前列腺癌的个体化精准诊疗、抗癌新药临床前药物筛选和前列腺癌的研究。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种前列腺癌PDX模型构建方法，包括以下步骤：

将剪碎后的动物组织块与细胞比例为2×10⁶-5×10⁶个/mL的精囊腺细胞悬液混匀获得混合液，然后将混合液与基质胶混合移植至动物体内，再将肿瘤细胞溶液移植至动物体内进行传代。

作为本发明所述前列腺癌PDX模型构建方法的优选实施方式，所述精囊腺细胞悬液中的精囊腺细胞比例为2×10⁶个/mL。

作为本发明所述前列腺癌PDX模型构建方法的优选实施方式，所述剪碎后的动物组织块的大小为10-30mm³。

作为本发明所述前列腺癌PDX模型构建方法的优选实施方式，所述剪碎后的动物组织块与精囊腺细胞悬液的体积为1:1。