[发明专利]基于类酶MOF信号放大传感器的制备

说明书

本发明公开了一种基于类酶MOF信号放大传感器的制备，首先合成了具有良好光电化学信号的ZnO‑ZnIn₂S₄，这个材料是拥有大比表面积的二维花状结构，能够有效的增加抗体生长的区域；另外在二抗上面修饰了MOF作为信号放大载体,一方面增加了传感器的阻抗，引起光电信号的减小，另一方面MOF可以作为类过氧化氢酶催化传感体系中电子供体过氧化氢的分解，导致光电子试剂的减小，使光电流信号进一步的减小，这样通过层层修饰构建成了检测前列腺抗原的光电化学传感器。

技术领域

本发明涉及前列腺特异性抗原的定量检测领域，更具体的说是基于类酶MOF信号放大传感器的制备。

背景技术

肿瘤标志物是肿瘤细胞通过基因表达而合成、分泌，或是机体因对肿瘤产生反应而异常产生的一类物质，在肿瘤早期诊断中有重要意义。癌症的早期诊断需要借助对其肿瘤标志物高选择性、高灵敏、快速分析检测的方法。因此，建立简单快速、灵敏和选择性好的恶性肿瘤生物标志物检测新方法，对恶性肿瘤的早期发现和和治疗效果评价具有十分重要的意义。

光电化学的高灵敏性结合适配体的选择性使得光电化学适配体传感器已成为分析化学领域新的研究热点，所产生的感应信号通过信号转换器转换成可输出的光电化学信号，该信号与目标分析物的浓度呈现一定的比例关系，从而可以实现对目标物质的定量分析。光电化学免疫传感器因其免疫反应的高特异性、简单的操作、高灵敏度、高选择性以及分析速度快等优点，在临床医学、环境污染物检测、食品分析、生物技术等领域得到广泛应用。

发明内容

本发明的目的在于构建一种基于MOF释放乳酸信号放大传感器的制备。

为了解决上述技术问题，本发明是通过以下措施来实现的：一种基于类酶MOF信号放大传感器的制备，其特征包括以下步骤：

（1）合成ZnO：将导电玻璃ITO切割为4.0×0.5 cm条状，依次用丙酮溶液、二次蒸馏水和无水乙醇超声清洗5 min，在氮气下自然干燥后，使用旋涂法在ITO表面旋涂一层0.25mol/mL醋酸锌溶液，并且在350 ºC下退火30 min，此后将退火后的ITO浸入到0.025 mol/mL六亚甲基四胺溶液和0.025 mol/mL硝酸锌混合溶液中，在95 ºC下放置6 h后自然冷却至室温，分别用无水乙醇和超纯水洗涤三次，在60 ºC下干燥12 h，得到ZnO；

（2）合成ZnO-ZnIn₂S₄：将0.4 mmol ZnSO₄·7H₂O、0.8 mmol InCl₃·4H₂O、1.6 mmol硫代乙酰胺溶于15 mL水中，常温下搅拌15 min后放置于反应釜中，将步骤（1）中ITO上面生长了ZnO基地置于反应釜中，随后在160 ºC下加热12 h，然后分别用无水乙醇和超纯水洗涤三次，在60 ºC下干燥12 h，得到ZnO-ZnIn₂S₄；

（3）合成MOF：将40 mg 2,2-二吡啶-5,5-二羧酸分散于18 mL N-N二甲基甲酰胺中，将3.06 mg氯化锆加入到此溶液中，超声10 min后将溶液在90 ºC下加热18 h，冷却至室温后在8000 rmp下离心10 min，分散于50 mL四氢呋喃中，然后将106 mg CuCl₂·2H₂O 加入到溶液中，超声10 min，搅拌2 h，得到所需要的MOF材料；

（4）合成SA-MOF：取4 mg步骤（3）合成的MOF溶解于4 mL的乙醇溶液中，随后加入200 μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷并且超声1 h，得到胺基化MOF材料，将得到的材料离心后分散于2 mL的PBS中，然后加入0.2 mL的戊二醛溶液，并在室温下孵育1 h后加入0.2 mL 的2mg/mL链霉亲和素，在4 ºC下孵育1 h，最后经过清洗、离心，将得到的沉淀溶于2 mL的PBS中，即得到SA-MOF;