[发明专利]基于表面等离子效应与金团簇信号放大传感器制备

权利要求书

1.基于表面等离子效应与金团簇信号放大传感器制备，其特征包括以下步骤：

（1）合成WS₂：将0.735g钨粉和0.4617g硫粉充分混合在一起然后放置于低压氩气封管，首先以3 ºC/min的速率升温至250 ºC使硫粉融化并与钨粉充分接触进行反应，保温180min后，接着以3 ºC/min的升温速率升至500 ºC使多余的硫升华并使WS₂重结晶，保温90min后自然冷却至室温，得到黑色WS₂粉末；

（2）合成WS₂@MoS₂：将1.32g钼酸钠、1.60g硫脲和0.15g聚乙二醇加入到20mL去离子水中充分搅拌1h，同时将一定量的WS₂也加入到20mL去离子水溶液中充分搅拌；将两种溶液充分混合，放入50mL高压反应釜内，将装有混合溶液的反应釜转移到烘箱中加热到200ºC并保持该温度24h，反应结束后将溶液自然冷却，离心干燥，得到WS₂@MoS₂；

（3）Au NCs-Ag@SiO₂ NPs的制备：将4mL的1%的柠檬酸钠加入到200mL沸腾的浓度为0.175mg/mL AgNO₃溶液中，并且持续搅拌1 h，得到Ag NPs；为了制备核壳Ag@SiO₂ NPs结构，将0.6mL氨水加入到10mL乙醇-水Ag NPs的混合溶液中；同时将20μL的10%正硅酸乙酯加入上述混合溶液中，以调节二氧化硅涂层的厚度；

（4）谷胱甘肽保护的Au NCs的制备：将2.06mL HAuCl₄溶液与22.94mL去离子水在室温下充分混合，在搅拌下加入0.023g谷胱甘肽，待溶液变无色后，在70℃下搅拌24h；

（5）Ab2-Au NCs-Ag@SiO₂ NPs的制备：将300μL的Ag@SiO₂ NPs溶液与200μL的浓度为1mg/mL的Au NCs混合，再加入去离子水稀释至1mL，随后在室温下震荡3h，得到Au NCs-Ag@SiO₂ NPs，然后将1mL浓度为10μg/mL的二抗，即Ab₂加入到溶液中，在4°C下孵育2h；用pH7.4的磷酸盐缓冲液洗涤3次去除没有复合的Ab₂;

（6）光电化学传感器的构建：导电玻璃为铟锡氧化物玻璃ITO，将导电玻璃切割为4.0×0.5cm条状，依次用丙酮溶液、二次蒸馏水和无水乙醇超声清洗5min，然后在氮气下干燥备用；将20μL上述制备的WS₂@MoS₂溶液涂在ITO电极表面，在室温下干燥，随后把6μL浓度为10μg/mL的一抗即Ab1在4ºC下孵育16h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲液彻底冲洗3次；继续滴涂20µL3%的牛血清白蛋白封堵非特异性结合位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲液彻底冲洗3次，将20μL不同浓度前列腺抗原滴加至电极表面，室温下孵育30min，用pH 7.4的磷酸盐缓冲液洗涤3次；继续滴加20 μL步骤（5）合成的Ab2-Au NCs-Ag@SiO₂ NPs，室温下孵育2h；

（7）夹心型信号放大生物传感器的光电化学检测：在步骤（6）处理好的修饰电极作为工作电极，对电极是铂丝电极，参比电极是Ag/AgCl电极，偏压数值为0 V，氙灯作为光源刺激，电解池为pH 7.4的磷酸盐缓冲液体系（1 mol/L的抗坏血酸），测定电流I-T曲线来进行光电性能的检测。