[发明专利]一种厚朴温中汤物质基准的质量控制方法

权利要求书

1.一种厚朴温中汤物质基准的质量控制方法，其特征在于：包括：分别采用薄层色谱法、HPLC特征图谱对厚朴温中汤物质基准进行定性分析，采用高效液相外标一点法对厚朴温中汤物质基准中的橙皮苷、和厚朴酚、厚朴酚进行定量分析；

采用薄层色谱法对厚朴温中汤物质基准进行定性分析，包括：

供试品溶液制备：取厚朴温中汤物质基准1g，加入水饱和的正丁醇10ml，超声处理30min，滤过，滤液用正丁醇饱和水洗涤3次，每次10ml，弃去水洗液，正丁醇液蒸干，残渣加2ml甲醇复溶，即得供试品溶液；

对照品溶液制备：称取厚朴酚、木香烃内酯、去氢木香内酯、6-姜辣素和桤木酮、橙皮苷、甘草苷对照品于容量瓶中，加甲醇溶解并稀释，得到混合对照品溶液；

甘草苷和橙皮苷的薄层色谱鉴别：吸取对照品溶液和供试品溶液各8μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，点样宽度为10mm，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂，展开8cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在波长365nm下检视，供试品色谱中，在与甘草苷对照品色谱相应的位置上，显相同的黄绿色荧光斑点，在与橙皮苷对照品色谱相应的位置上，显相同显色的深色斑点；

厚朴酚、桤木酮、去氢木香内酯、木香烃内酯和6-姜辣素的薄层色谱鉴别：吸取对照品溶液和供试品溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，点样宽度为10mm，甲苯-乙酸乙酯-乙酸-甲醇为展开剂，展开10cm，取出，晾干，在波长254nm下检视，供试品色谱中，在与厚朴酚对照品色谱相应的位置上，显相同的浅蓝色荧光斑点；再喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与桤木酮、去氢木香内酯、木香烃内酯、6-姜辣素对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点；

乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水中乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸和水的体积比＝15:1:1:2；甲苯-乙酸乙酯-乙酸-甲醇中甲苯、乙酸乙酯、乙酸和甲醇的体积比＝26:2:1:0.5；

定量分析包括：

步骤(1)、制备供试品溶液：取厚朴温中汤物质基准，加入提取溶剂，超声提取，放冷，补足提取溶剂失重，摇匀，0.45μm滤器过滤，取续滤液作为供试品溶液；其中，所述的厚朴温中汤物质基准和提取溶剂的用量比为0.2g:10ml～20ml；所述的提取溶剂为50％甲醇或50％乙醇；超声提取的时间为15min～45min；

制备对照品溶液：取橙皮苷对照品、和厚朴酚对照品、厚朴酚对照品，加提取溶剂溶解，得到含橙皮苷5.26～507μg/ml、厚朴酚1.07～103.6μg/ml、和厚朴酚1.07～102.9μg/ml的混合对照品溶液；

步骤(2)、分别将供试品溶液、对照品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，用外标一点法分别计算厚朴温中汤物质基准中的橙皮苷、和厚朴酚、厚朴酚的含量；其中，高效液相色谱的条件为：C18色谱柱，以0.1％甲酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；流速：0.8～1.0ml/min；柱温：25℃～35℃；检测波长：290nm；进样体积：10μl；

梯度洗脱程序为：

2.根据权利要求1所述的厚朴温中汤物质基准的质量控制方法，其特征在于：所述的厚朴温中汤物质基准和提取溶剂的用量比为0.2g:10ml；所述的提取溶剂为50％乙醇；超声提取的时间为30min。

3.根据权利要求1所述的厚朴温中汤物质基准的质量控制方法，其特征在于：高效液相色谱的条件为：色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18，4.6×250mm，5μm；以0.1％甲酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；流速：0.9ml/min；柱温：25℃；检测波长：290nm；进样体积：10μl。