[发明专利]一种针头取样-微萃取-催化显色检测生物胺的方法

权利要求书

1.一种针头取样-微萃取-催化显色检测生物胺的方法，其特征在于，具体操作步骤如下：

(1.1)、先向离心管中加入DAO溶液，再加入BAs溶液，反应20-35min，加入混合显色液，反应10-25min，随后用超微量紫外-可见分光光度计在650nm处进行检测，绘制BAs与紫外强度相关的标准曲线；

所述DAO溶液：浓度为5mg/mL，溶剂0.1M PBS，pH 7.2；

所述混合显色液为0.8M CH₃COOH溶液、0.1M TMB和0.5mg/mL ATO水溶液按体积比7:1:1的混合液；

(1.2)、用注射泵吸取DAO溶液，将针头扎入肉样中，顺时针逆时针各旋转一周，将针头斜面压在肉样上取出，将注射泵与针头组装，推动注射泵活塞，打一滴DAO溶液，使肉样浸润在其中反应25-40min；

所述注射泵规格为1mL，针头规格为1.2*38mm；

(1.3)、拉动注射泵活塞，将萃取了BAs的液滴抽回，用干净针头取出肉样，用注射泵吸取混合显色液，反应10-25min；

(1.4)、检测时，打出一滴用超微量紫外-可见分光光度计对显色液滴进行分析检测其中氧化TMB的紫外-可见光强度，从上述标准曲线上计算肉样中BAs的浓度；所述针头规格为0.45*16mm。

2.根据权利要求1所述的一种针头取样-微萃取-催化显色检测生物胺的方法，其特征在于，具体检测方法：

(1)、先向离心管中加入100μL DAO溶液，再加入5μL BAs溶液，37℃水浴孵化反应20-35min，冷却后加入45μL混合显色液，反应10-25min，用移液枪移取2μL，随后用超微量紫外-可见分光光度计在650nm处进行检测，绘制BAs与紫外强度相关的标准曲线；

(2)、用注射泵吸取100μL DAO溶液，将针头扎入肉样中，顺时针逆时针各旋转一周，将针头斜面压在肉样上取出，将注射泵与针头组装，推动注射泵活塞，打一滴DAO溶液，使肉样浸润在其中反应25-40min；

(3)、拉动注射泵 活塞，将萃取了BAs的液滴抽回，用干净针头取出肉样，用注射泵 吸取45μL混合显色液，反应10-25min后；

(4)、检测时，打出一滴用超微量紫外-可见分光光度计对显色液滴进行分析检测其中氧化TMB的紫外-可见光强度，从上述标准曲线上计算肉样中BAs的浓度；

其中，所述DAO溶液为：浓度5mg/mL，溶剂0.1M PBS，pH 7.2；

所述混合显色液为0.8M CH₃COOH溶液、0.1M TMB和0.5mg/mL ATO水溶液按体积比7:1:1的混合液。