[发明专利]用于检测阴道加德纳菌荧光免疫层析试纸条、试剂盒及应用

说明书

本发明属于微生物免疫检测技术领域，具体涉及一种阴道加德纳菌荧光免疫层析试纸条、试剂盒和应用。本发明的用于检测阴道加德纳菌的荧光免疫层析试纸条，包括底板，所述底板延其长度方向顺次设置有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸样垫，其中，所述结合垫上固定有荧光微球标记的抗阴道加德纳菌单克隆抗体，硝酸纤维素膜上设置有检测T线和质控C线，检测T线上包被有阴道加德纳菌单克隆抗体，质控C线上包被有二抗IgG。本发明的试剂盒具有灵敏度高、稳定性好、受自然荧光干扰低等优点，同时其配套使用的设备精巧，无需大型仪器设备，适用于基层医院及大医院检验科。

技术领域

本发明属于微生物免疫检测技术领域，具体涉及一种阴道加德纳菌荧光免疫层析试纸条、试剂盒和应用。

背景技术

加德纳菌性阴道炎，又名嗜血杆菌性阴道炎，是由加德纳杆菌引起的一种阴道粘膜炎症。其曾归于棒杆菌性阴道炎，因可通过性交传染，故列为性传播疾病。

阴道加德纳菌为革兰氏阴性细小杆菌，常呈球杆状，有时呈丝状和多形状，常见两极染色。宽0.4～0.6微米，长1～2微米大小，无活动力、无鞭毛、无芽孢。加德纳杆菌引起的感染多数较轻，多见于性活跃妇女。急性期白带增多，有鱼腥或氨的臭味，外阴潮湿不适，常伴有阴道灼热感、性交痛及外阴骚痒。检查见部分患者外阴红肿，阴道粘膜充血，呈灰红色，轻度红肿，分泌物多呈均质性，稀薄，灰白色，有时为乳黄色或类绿色，腥臭味，阴道pH常为5-5.5。有时白带量少，仅有薄薄一层，如膜样覆盖在充血的阴道壁上。少数患者阴道壁有红斑或淤点，孕妇患者可引起流产或产后子宫内膜炎。感染重者也可导致败血症、尿道感染、肾周脓肿和膀胱炎等。

现有技术采用微生物染色方法鉴别阴道分泌物中的阴道加德纳菌，染色过程简单，但是，该方法不但阅片较为复杂，阅片速度和实验员的经验有很大关系，而且灵敏度低，只能定性检测，不能进行定量检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种阴道加德纳菌荧光免疫层析试纸条。

本发明的再一目的在于提供一种阴道加德纳菌的检测试剂盒。

本发明的再一目的在于提供上述试纸条、试剂盒的应用。

根据本发明具体实施方式的用于检测阴道加德纳菌的荧光免疫层析试纸条，所述试纸条包括底板，所述底板延其长度方向顺次设置有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸样垫，其中，

所述结合垫上固定有荧光微球标记的抗阴道加德纳菌单克隆抗体，

硝酸纤维素膜上设置有检测T线和质控C线，检测T线上包被有阴道加德纳菌单克隆抗体，质控C线上包被有二抗IgG。

其中，荧光微球包括时间分辨荧光微球和普通荧光微球。

根据本发明具体实施方式的用于检测阴道加德纳菌的荧光免疫层析试纸条，所述结合垫由包括以下步骤的方法制备得到：

(1)抗体反应：按重量比，将抗阴道加德纳菌单克隆抗体与荧光微球按1:15～50的比例混合，36～38℃条件下反应1～3h，得到荧光微球标记的抗阴道加德纳菌单克隆抗体；

(2)封闭；

(3)铺结合垫：将荧光微球标记的抗阴道加德纳菌单克隆抗体以浓度2～12μL/cm均匀喷涂在结合垫上，进行干燥。

根据本发明具体实施方式的用于检测阴道加德纳菌的荧光免疫层析试纸条，结合垫的具体制备过程为：

(1)缓冲液置换：取微粒加入MES缓冲液离心，去除上清，加入少量MES超声重悬，待用；

(2)活化：向微球中加入NHS和EDC，混匀，37℃旋转反应30min。