[发明专利]一种基于bt2分子标记选育甜糯双隐性玉米自交系的方法

说明书

本发明公开了一种基于bt2分子标记选育甜糯双隐性玉米自交系的方法，首先选择遗传距离相近的糯玉米材料和甜玉米材料分别构建NA群和TA群，将NA群品系和TA群品系杂交，再使用利用bt2基因的特异性引物B1、B2筛选出含隐性bt2基因的糯质玉米自交一代作为候选供体亲本，从中选择褶皱籽粒，即得到甜糯双隐性单株，入选的单株再经三世代的优选株自交得到甜糯双隐性玉米自交系。与传统育种技术相比，本发明的甜糯双隐性玉米自交系选育方法通过特异性引物B1、B2检测后代基因型，能准确高效地在后代中筛选含有隐性bt2基因的个体，显著提高了甜糯双隐性玉米自交系的选育效率。

技术领域

本发明涉及作物遗传育种技术领域，具体涉及一种基于bt2分子标记选育甜糯双隐性玉米自交系的方法。

背景技术

随着人们对鲜食玉米的喜爱和消费需求日益增强，鲜食玉米种植面积逐年扩增。市场对鲜食6玉米的需求，不仅仅停留在鲜食玉米的商品外观性、贮运能力上，更是对优质口感提出了更高的要求。甜糯玉米是近年来我国最具发展潜力的新型鲜食玉米，由于糯中带甜，甜度适中的独特口感，广受消费者的喜爱。进入21世纪，我国糯玉米生产在城市消费的拉动下发展迅猛，全国糯玉米种植面积超过1000万亩，其中作为鲜食用有600万亩，在育种的广度和深度上也有了极大的提高，特别是在鲜食糯玉米品种选育方面，已处于世界领先地位，育成了一大批优良糯玉米新品种，但由于长期对鲜食糯玉米品种品质改良的忽视，鲜食糯玉米品种普遍表现产品类型单一、产量低、口感差、加工质量参差不齐等劣势。本地农家品种由于种质遗传基础狭窄，虽鲜食品质较佳，但产量低；温带引进的品种由于不适应热带亚热带地区高温高湿的环境条件，抗病性和稳产性较差，热带亚热带地区目前育成的多数糯玉米杂交种在品质方面与外来品种的差距还较大，主要存在整齐度较差、皮厚渣多、糯性退化和风味口感差等问题。而我国的甜加糯玉米生产和市场需求正在迅速增长，所以，迫切需要加快选育具有自主知识产权的优质高产抗逆性强的甜加糯玉米杂交新品种，以取代目前所使用的品种。

甜糯玉米杂交新品种的育种依赖于双隐性(如wxwxbt2bt2)自交系作为亲本。通常情况下，育种家们利用甜糯材料进行杂交测配，再从多代群体中观察甜粒和糯粒分离比是否符合孟德尔定律，再推断所选材料是否为甜糯玉米自交系。这种选育甜糯玉米自交系的方式，不仅费时、费力、效率低，同时容易产生基因连锁累赘而影响选育甜糯玉米品种的口感，难以选育新的甜糯玉米品种。因此，建立科学、实用、便捷的鲜食甜糯玉米自交系鉴别方法，对于快速精准选育甜糯玉米品种具有十分重要的应用价值。

发明内容

本发明的目的是为解决以上提出的问题，提供一种基于bt2分子标记选育甜糯双隐性玉米自交系的方法。

本发明的方法是通过以下步骤实现的：

步骤S1，使用《中华人民共和国农业行业标准NY/T1432-2014玉米品种鉴定技术规程SSR标记法》所公布的40对SSR分子标记，通过PCR实验对现有糯玉米品种进行等位基因分型，然后计算它们的遗传相似系数，再进行遗传多样性分析，通过群体结构划分，选择6个遗传距离相近的糯玉米材料组建糯玉米育种群体，经过充分混粉杂交后，应用混合选择法对该群体的产量、抗病性及其主要性状进行选择而构建NA群；

步骤S2，提取现有甜玉米品种的DNA，利用bt2基因的特异性引物B1、B2检测甜玉米bt2基因，筛选出bt2bt2基因型的甜玉米材料；特异性引物B1的碱基序列如SEQ ID NO.1，特异性引物B2的碱基序列如SEQ ID NO.2所示；

步骤S3，使用《中华人民共和国农业行业标准NY/T1432-2014玉米品种鉴定技术规程SSR标记法》所公布的40对SSR分子标记，通过PCR实验对步骤S2筛选得到的甜玉米材料进行等位基因分型，然后计算它们的遗传相似系数，再进行遗传多样性分析，通过群体结构划分，选择4个遗传距离相近的甜玉米材料，经过充分混粉杂交后，应用混合选择法对该群体的产量、抗病性及其主要性状进行选择而构建TA群；