[发明专利]用于鉴别含有鹿角或鹿皮的配方颗粒的特征肽段及其检测方法

说明书

本发明公开了一种用于鉴别含有鹿角或鹿皮的配方颗粒的特征肽段及其检测方法，该特征肽段为肽1~肽4，如序列表1，本发明通过以肽4为参比，以肽1峰面积A_肽1与肽4峰面积A_肽4的比值或肽2峰面积A_肽2与肽4峰面积A_肽4的比值或肽3峰面积A_肽3与肽4峰面积A_肽4的比值用于鹿角或鹿皮配方颗粒的质量控制。本发明采用液相色谱‑串连质谱法以电喷雾正离子模式进行多反应检测，肽1母离子为612.2，且子离子为747.4、464.2；肽2母离子为871.4，且子离子为726.4、862.9；肽3母离子为808.9，且子离子为892.4、554.3，肽4母离子为596.8，且子离子518.7为本发明鹿角胶特征肽，能够辨识鉴别鹿角胶与鹿皮胶，该方法专属性强、灵敏度高、操作简单，可用于鹿皮胶与鹿角胶的鉴别及质量控制。

技术领域

本发明涉及一种鹿源特征肽段及其检测方法，具体涉及鉴别鹿角胶与鹿皮胶，以及鹿角胶配方颗粒、鹿角配方颗粒、以鹿角胶为原料的药品、保健品、食品的质量控制。

技术背景

胶类药材包括阿胶、鹿皮胶、鹿角胶、黄明胶等，80％以上的成分为不同类别的胶原蛋白，包括I型胶原α1链(COL1A1)、I型胶原α2链(COL1A2)、II型胶原α1链(COL2A1)、III型胶原α1链(COL3A1)等，其中以COL1A2来源的肽段为主。COL1A2作为高保守蛋白质，广泛存在于不同动物种体内，是构成胶类药材的重要蛋白类成分之一。

鹿角胶与鹿皮胶均来源于梅花鹿或马鹿，两者为名贵胶类中药材，鹿角胶为梅花鹿或马鹿角经水煎煮、浓缩制成的固体胶，鹿皮胶为梅花鹿或马鹿的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。鹿角为马鹿或梅花鹿已骨化的角，价格远高于鹿皮，市场上存在以鹿皮胶掺入鹿角胶以次充好的现象。如何将鹿皮胶与鹿角胶进行鉴别，着实是胶类药材鉴定研究的难题，给鹿角胶与鹿皮胶鉴别，以及鹿角胶掺入鹿皮胶的伪品鉴别都带来了挑战。

鹿角胶配方颗粒、鹿角配方颗粒，以鹿角胶为原料的药品、保健品、食品均经过复杂加工过程，如有鹿皮胶掺伪情况，仅从外观上难以辨别，且鹿角与鹿皮的蛋白质组成相同，现有的种属专属肽无法鉴别鹿角胶与鹿皮胶。

发明内容：

发明目的：本发明通过大量的实验筛选，研究确定4条鹿源肽段相对含量的比值，从而用来鉴别鹿角胶与鹿皮胶。该方法专属性强、灵敏度高、操作简单，可用于鹿角胶及其相关产品的质量控制。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于鉴别含有鹿角或鹿皮的配方颗粒的特征肽段，其特征在于，所述的特征肽为：

肽1:

Gly-Phe-Hyp-Gly-Thr-Pro-Gly-Leu-Hyp-Gly-Phe-Lys

肽2：

Gly-Pro-Ile-Gly-Pro-Hyp-Gly-Pro-Ala-Gly-Ala-Hyp-Gly-Asp-Lys-Gly-Glu-Thr-Gly-Pro-Ser-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Thr-Gly-Ala-Arg

肽3：

Gly-Glu-Leu-Gly-Pro-Val-Gly-Asn-Hyp-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Arg

肽4：

Gly-Val-Hyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Ala-Val-Gly-Pro-Ala-Gly-Lys。

一种用于鉴别含有鹿角或鹿皮的配方颗粒的特征肽段的检测方法，其包括以下步骤：

(1)将上述的肽1～肽4，4个鹿源特征肽配成混合对照品溶液；