[发明专利]FSTL1在肝脏等组织抗纤维化的稳态调节中的保护作用与应用

权利要求书

1.一种制备与组织纤维化密切相关的血管内皮细胞FSTL1基因敲除非人动物模型及其后代的方法，其中，该方法的具体制备步骤为：

利用Cre-LoxP系统，获得FSTL1条件性敲除模型Fstl1^Flox/Flox非人动物；同时利用Fstl1^+/-非人动物与Tek-cre非人动物交配得到Fstl1^+/-，Tek-cre的非人动物，再用所述Fstl1^+/-，Tek-cre非人动物与Fstl1^Flox/Flox非人动物交配得到Fstl1^Flox/-，Tek-cre血管内皮细胞敲除FSTL1的非人动物模型，即Fstl1^-/ECKO，

其中，所述组织选自肺、肝脏、和肾脏中的至少一种，所述非人动物模型可用于模拟肺组织纤维化疾病、肝组织纤维化疾病、肾脏组织纤维化疾病、和右心室扩张病变中的至少一种。

2.一种制备与组织纤维化密切相关的全身性或血管内皮细胞诱导性敲除FSTL1基因的非人动物模型及其后代的方法，其中，该方法的具体制备步骤为：

i)将Fstl1^+/-非人动物与表达UBC-Cre/ERT2或VE-Cadherin-Cre/ERT2的转基因非人动物交配得到Fstl1^+/-；Cre/ERT2非人动物；

ii)再用所述Fstl1^+/-；Cre/ERT2非人动物与Fstl1^Flox/Flox非人动物交配分别得到基因型为Fstl1^Flox/-；UBC-Cre/ERT2或Fstl1^Flox/-；VE-Cadherin-Cre/ERT2、以及Fstl1^Flox/+；UBC-Cre/ERT2或Fstl1^Flox/+；VE-Cadherin-Cre/ERT2的非人动物模型，

其中，所述组织选自肺、肝脏、和肾脏中的至少一种，所述非人动物模型可用于模拟肺组织纤维化疾病、肝组织纤维化疾病、肾脏组织纤维化疾病、和右心室扩张病变中的至少一种。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述右心室扩张病变选自肺动脉高压及其他肺源性高血压、右心室或左心室心肌症、右心室缺血或梗死、肺动脉瓣和三尖瓣病变的至少一种。

4.如权利要求1或2所述方法，其中所述非人动物为哺乳动物。

5.如权利要求4所述方法，其中所述哺乳动物为啮齿类动物。

6.如权利要求5所述方法，其中所述啮齿类动物为小鼠。

7.如权利要求2所述的方法，进步一包括步骤

iii)在非人动物出生1-8天或2周至成年，使用不同剂量的基因敲除诱导剂诱导非人动物，使得非人动物受外源启动子控制地进行FSTL1等位基因的条件性敲除，制备严重组织纤维化病变的模型或较轻组织纤维化病变的模型。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述基因敲除诱导剂包括四环素、干扰素、激素。

9.如权利要求8所述方法，其中所述激素为他莫昔酚。

10.如权利要求9所述的方法，其中在步骤iii)中，在出生后1-4天，使用剂量为50-70μg/天的他莫昔酚诱导。

11.如权利要求9所述的方法，其中在步骤iii)中，在出生后5-8天，使用剂量为90-100μg/天的他莫昔酚诱导。

12.如权利要求9所述的方法，其中在步骤iii)中，在出生后2周到成年，使用剂量为500-1000μg/天的他莫昔酚诱导。