[发明专利]FSTL1在肝脏等组织抗纤维化的稳态调节中的保护作用与应用

说明书

本发明涉及FSTL1蛋白或FSTL1调节化合物在制备用于治疗组织纤维化病变的药物中的用途。本发明还涉及一种与组织纤维化病变程度密切相关的条件性FSTL1基因敲除非人动物模型和制备方法，及其在筛选抗组织纤维化药物中的用途。其中通过结合他莫昔酚不同剂量、及动物生长不同阶段进行处理，获得全身性或血管内皮细胞FSTL1基因诱导性敲除的非人动物模型，用以模拟不同组织纤维化的病变。

技术领域

本发明FSTL1蛋白或其调节化合物在制备用于治疗肝脏、肺、肾脏等组织器官中抗纤维化稳态调节及抗右心室扩张的药物中的用途。本发明还涉及一种非人转基因动物模型及其构建方法和应用，尤其是涉及一种由不同剂量他莫昔酚在动物不同生长阶段诱导的可控的卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)基因条件性敲除转基因小鼠动物模型、构建方法及其在组织纤维化病变中的应用。

背景技术

卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)是一种分泌性的糖蛋白，最初从小鼠成骨细胞系MC3T3克隆得到，该蛋白在除血液细胞外的多种细胞中表达，特别是在间充质系细胞中表达水平较高(Knight,C.,et al.,J Dent Res,2001.80(10):p.1895-902；Geng,Y.,et al.,ProcNatl Acad Sci U S A,2011.108(17):p.7058-63；Sylva,M.,et al.,PLoS One,2011.6(8):p.e22616；Tanaka,M.,et al.,Int Immunol,1998.10(9):p.1305-14.；Wilson,D.C.,et al.,Arthritis Rheum,2010.62(8):p.2510-6.；Chaly,Y.,et al.,Arthritis Rheum,2012.64(4):p.1082-8.)。虽然FSTL1的生物学功能尚不完全清楚，但从现有的研究来看，其作用涉及心血管疾病、机体免疫调节、呼吸系统及骨骼肌发育等多个方面(Oshima,Y.,etal.,Circulation,2008.117(24):p.3099-108.；Liu,S.,et al.,Am J PhysiolEndocrinol Metab,2010.299(3):p.E351-63；Ouchi,N.,et al.,J Biol Chem,2008.283(47):p.32802-11.；Trojan,L.,et al.,Anticancer Res,2005.25(1a):p.183-91.；Sundaram,G.M.,et al.,Nature,2013.495(7439):p.103-6.)。FSTL1全身性敲除会导致新生小鼠死亡，且呼吸系统及骨骼等多种组织器官会发育异常(Chaly,Y.,et al.,Ann RheumDis,2014.)。然而，体内的复杂环境限制了这种非特异性小鼠敲除模型的应用，因此，我们建立了一种在血管内皮细胞特异性可诱导敲除FSTL1的小鼠模型，用于研究血管内皮细胞来源的FSTL1的生物学作用及其在相关疾病研究中的应用。

纤维化是指组织器官的病理性增生、硬化及疤痕修复过程，主要特征包括肌成纤维细胞分化增殖、及以胶原为主的胞外基质积累。组织纤维化是由于多种刺激因素引起的持续慢性炎症的结果，这些因素包括持续感染、自身免疫反应、过敏反应、药物、辐射等理化因素以及组织损伤等(Wynn,T.A.,J Pathol,2008.214(2):p.199-210.)。肝纤维化在临床较为常见，包括病毒性肝炎、酒精肝、脂肪肝等。有研究表明，抑制FSTL1可以减少博莱霉素引起的肺纤维化(Dong,Y.,et al.,J Exp Med,2015.212(2):p.235-52.)。另外，在冠状动脉结扎的心肌梗塞小鼠模型中，通过给梗死心肌提供FSTL1可以减少受损区域附近的心脏纤维化(Wei,K.,et al.,Nature,2015.525(7570):p.479-85.)。然而，尚未有研究表明FSTL1与肝脏纤维化有关系。目前，在生物医学实验中，建立肝纤维化模型的试验方法主要有胆管结扎，硫代乙酰胺、四氯化碳化学诱导等，但这些动物模型往往不能真实反应肝组织纤维化的病理过程。