[发明专利]一种胰岛素样生长因子2在促进癌细胞分化成脂肪细胞中的应用有效
申请号: | 202110441475.4 | 申请日: | 2021-04-23 |
公开(公告)号: | CN113151161B | 公开(公告)日: | 2023-02-17 |
发明(设计)人: | 张传茂;王向阳;辛广伟;迟王菲 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/09 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 陈征 |
地址: | 100871*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胰岛素 生长因子 促进 癌细胞 化成 脂肪 细胞 中的 应用 | ||
1.一种体外诱导癌细胞分化成脂肪细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将癌细胞于基础培养基中进行培养,待细胞汇合度达50%-70%时,加入终浓度为100-300 ng/mL的胰岛素样生长因子2,对癌细胞预处理20-30小时;所述癌细胞为处于上皮状态的癌细胞和/或处于间充质状态的癌细胞;
(2)将步骤(1)的基础培养基换成诱导分化培养基①,培养4天;
(3)将诱导分化培养基①换成诱导分化培养基②,培养2天;
(4)换成基础培养基,培养10天;
其中,所述基础培养基为仅含5%-20%胎牛血清、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的高糖DMEM培养基;
所述诱导分化培养基①为仅含0.5-1 μM地塞米松,5-20 μg/mL胰岛素,1-2 μM罗格列酮,0.2-0.5 mM 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤的基础培养基;
所述诱导分化培养基②为仅含5-20 μg/mL胰岛素的基础培养基。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述诱导分化培养基①为仅含1 μM地塞米松,10 μg/mL胰岛素,2 μM罗格列酮,0.5 mM 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤的所述基础培养基;
所述诱导分化培养基②为仅含10 μg/mL胰岛素的所述基础培养基。
3.根据权利要求1-2任一所述的方法,其特征在于,诱导分化的环境条件为35℃~37℃,5% CO2。
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