[发明专利]一种胰岛素样生长因子2在促进癌细胞分化成脂肪细胞中的应用

说明书

本发明提供了胰岛素样生长因子2在促进癌细胞分化成脂肪细胞中的应用，是将癌细胞在进行体外诱导分化之前，用终浓度为50‑400ng/mL的胰岛素样生长因子2(IGF2)对细胞进行预处理，然后将癌细胞于诱导分化培养基①培养4‑8天；再将诱导分化培养基①换成诱导分化培养基②培养1‑4天；然后换成基础培养基培养6‑12天。这种“先IGF2预处理，再诱导分化”的模式能够高效率地将癌细胞成功诱导分化成脂肪细胞，获得的脂肪细胞数明显多于未经IGF2预处理的对照组，脂肪细胞标志基因的表达提高到对照组的11‑17倍。本方法可以高效地将癌细胞诱导分化成脂肪细胞，有效抑制癌细胞的增殖和转移，具有良好的临床应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及胰岛素样生长因子2在促进癌细胞分化成脂肪细胞中的应用。

背景技术

在癌症病情发展过程中，存在一个叫做“上皮-间充质转化”(EMT，epithelial–mesenchymal transitions)的阶段，该阶段内，癌细胞具有类似于“干细胞”的特质，有潜力转化成多种细胞类型。上皮细胞可向间质细胞形态转化，导致细胞极性丧失、黏附能力下降、细胞骨架发生变化，从而增强细胞迁移和运动的能力，利用EMT这些癌细胞会从初始的肿瘤中脱离，向远处发生转移。研究证实EMT是与癌症的侵袭和转移有牵连的关键事件。肿瘤细胞经过血液循环传播后，肿瘤细胞会发生间质上皮转化(MET，mesenchymal–epithelial transitions)，形成继发性的肿瘤转移灶。MET是EMT的逆过程，癌细胞由间质细胞形态变回上皮细胞形态，增殖能力增强，生长更快。

科学家在小鼠身上使用罗格列酮联合MEK抑制剂曲米替尼，让乳腺癌细胞分化成脂肪细胞，降低了肿瘤的侵袭性，抑制了肿瘤转移，其主要采用的方法是：将乳腺癌细胞接种到培养皿中，过夜培养后用200ng/ml的人源重组BMP2蛋白处理3天，然后用200ng/ml的BMP2和2uM的Rosiglitazone(罗格列酮)处理4天，然后再用2μM的罗格列酮处理3天。其采用的培养基为含有10％胎牛血清的DMEM培养基。结果显示，经过罗格列酮+骨形成蛋白-2(BMP-2)的诱导后，EMT后的乳腺癌细胞转化成了脂肪细胞，表达各种脂肪细胞标志物，对异丙肾上腺素和胰岛素的反应也跟脂肪细胞一样；并且在诱导分化9天后之后，研究人员撤去诱导分化培养基，换上普通培养基，观察发现这些分化成的脂肪细胞保持着脂肪细胞的特征，并没有出现恢复成间充质样的癌细胞的情况，证实这种诱导分化是不可逆的。

但是这种癌细胞诱导分化方法存在明显的缺陷。该方法只能将EMT之后的癌细胞诱导分化成脂肪细胞，即只能将处于间充质状态的癌细胞诱导分化，而不能将处于上皮状态的癌细胞诱导分化。该方法中BMP2的使用就是为了促进癌细胞EMT转化。因此，该方法对癌细胞的诱导分化条件苛刻，具有很大局限性，不具有普遍性。

发明人前期研究中，发现胰岛素样生长因子2在促进人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞中具有优异的促进转化的效果(参见中国专利CN111518752A)，但正常的人皮肤成纤维细胞与癌细胞在生长发育、生理机制等方面存在明显的不同，主要表现在：第一，人皮肤成纤维细胞传代次数有限，不具有无限增殖、转移的能力，不会经历EMT或者MET转化。而癌细胞属于无限增殖细胞，并具有恶性转移的能力，会经历EMT或者MET转化。第二，人皮肤成纤维细胞一般处于静息状态，通常会在创伤修复时大量增殖，并分泌胶原纤维和胞外基质，参与伤口愈合。而癌细胞时刻处于增殖或转移状态，几乎不分泌胶原纤维和胞外基质。第三，人皮肤成纤维细胞由胚胎时期的间充质细胞分化而来，一般存在于皮肤的结缔组织中，处于间充质状态。而癌细胞种类繁多，来源广泛，有的处于上皮状态，有的则处于间充质状态。因此，癌细胞的诱导分化较为复杂、困难。有待于研究更加简便、普适性强的有效方法用于癌细胞向脂肪细胞的诱导分化。

发明内容

本发明的目的是提供胰岛素样生长因子2(IGF2)在促进癌细胞分化成脂肪细胞中的应用。

第一方面，本发明提供了胰岛素样生长因子2在促进癌细胞分化成脂肪细胞中的应用。