[发明专利]黄氏响声茶中贝母素甲与贝母素乙含量测定的方法

权利要求书

1.一种黄氏响声茶中贝母素甲与贝母素乙含量测定方法，所述方法，步骤如下：

步骤1，对照品溶液：取贝母素甲对照品和贝母素乙对照品适量，精密称定，加甲醇制成贝母素甲和贝母素乙的混合溶液；

步骤2，供试品溶液：取黄氏响声茶，精密称定，经提取，滤过，洗涤，挥干，残渣用甲醇配制成供试品溶液；

步骤3，将对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，计算供试品溶液中贝母素甲和贝母素乙含量。其中，所述色谱仪的色谱条件如下：

仪器：液相色谱仪，ELSD检测器

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm×5μm)

流动相：乙腈，水，二乙胺。

2.根据权利要求1所述的测定方法，所述方法，步骤如下：

步骤1，对照品溶液：取贝母素甲对照品和贝母素乙对照品适量，精密称定，加甲醇制成贝母素甲和贝母素乙的混合溶液，其中，贝母素甲浓度为0.1-0.48mg/ml，贝母素乙浓度为0.1-0.48mg/ml，

步骤2，供试品溶液：取黄氏响声茶8g，精密称定，加氨水和乙醇混合溶液湿润，加乙醚，三氯甲烷，乙醇混合溶液提取，提取液滤过，滤渣用乙醚，三氯甲烷，乙醇混合溶液洗涤，合并滤液及洗液，挥干溶剂，残渣用甲醇溶解至刻度即得；

步骤3，将对照品溶液和供试品溶液5-20μl，注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，计算供试品溶液中贝母素甲和贝母素乙含量。

其中，所述色谱仪的色谱条件如下：

仪器：液相色谱仪，ELSD检测器

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm×5μm)

流动相：乙腈：水：二乙胺＝65：35：0.03

检测器：漂移管温度：65-75℃；气体流速：1.2-1.6ml/min；增益参数：1，柱温：25-35℃；流速：0.8-1.2ml/min；进样量：5-20μl；运行时间：30-50min。

3.根据权利要求2所述的测定方法，所述方法，步骤如下：

步骤1，对照品溶液：取贝母素甲对照品和贝母素乙对照品适量，精密称定，加甲醇制成贝母素甲和贝母素乙的混合溶液，浓度分别为0.10mg/ml、0.24mg/ml、0.48mg/ml。

步骤2，供试品溶液：取本品适量，取约8g，精密称定，滴加浓氨水-乙醇＝1：1混合溶液6ml使湿润，密塞，放置30min，加乙醚：三氯甲烷：乙醇＝50：16：5混合溶液50ml，超声处理1h，滤过，滤渣用乙醚：三氯甲烷：乙醇＝50：16：5混合溶液适量洗涤，合并滤液及洗液，置温水浴上挥干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

步骤3，将对照品溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，计算供试品溶液中贝母素甲和贝母素乙含量。

其中，所述色谱仪的色谱条件如下：

仪器：液相色谱仪，ELSD检测器

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm×5μm)

流动相：乙腈：水：二乙胺＝65：35：0.03

检测器：漂移管温度：70℃；气体流速：1.4ml/min；增益参数：1。

柱温：30℃；流速：1.0ml/min；进样量：20μl；运行时间：40min。