[发明专利]一种蛋白酶的精制和干燥方法

权利要求书

1.一种蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

（1）在常温下，将粗制蛋白酶原料和水加入到提取罐中，再将钠盐完全溶于水制成溶液后加入到提取罐中，搅拌80～100min，结束后静置35～45min；其中，加料完毕后，混合液中粗制蛋白酶原料和水的重量比为1:15～20，钠盐的质量百分比为1～1.5%；

（2）往步骤（1）得到的提取液中加入絮凝剂Ⅰ，静置絮凝8～12h；将上清液分离到储罐中；下浊液经搅拌均匀后送入离心机进行分离，回收分离液A；

（3）往分离液A中加入适量水进行稀释，再加入絮凝剂Ⅱ静置絮凝1～3h，将上清液分离到储罐中；下浊液经搅拌均匀后送入离心机进行分离，回收分离液B；

（4）再将分离液B用离心机进行分离，回收分离液C，对得到的分离液C和步骤（2）、（3）得到的上清液用袋式过滤器进行过滤，滤液再经过两级微滤过滤，回收微滤滤液经超滤进行浓缩、除盐，得到纯净的蛋白酶浓缩液；

（5）对真空冷冻干燥机的物料干燥舱及物料托盘进行消毒灭菌，将得到的蛋白酶浓缩液用泵送至真空冷冻干燥机并均匀地分装在物料干燥舱内的物料托盘上，然后关闭并密封物料干燥舱，对蛋白酶浓缩液进行真空冷冻干燥，得到水分含量为1～5%的冻干蛋白酶。

2.根据权利要求1所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述絮凝剂Ⅰ包括钠盐、钙盐；所述絮凝剂Ⅱ包括钠盐、钙盐、聚丙烯酰胺。

3.根据权利要求2所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，絮凝剂的添加方法是：先将絮凝剂各成分分别溶于水中制成溶液，溶液温度控制在30℃以下，再将钠盐溶液、钙盐溶液、聚丙烯酰胺溶液依次在缓慢搅拌下添加；絮凝过程温度控制在23℃以内。

4.根据权利要求1所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述真空冷冻干燥机包括物料干燥舱、捕水器、制冷装置、抽真空装置和加热装置，制冷装置、抽真空装置和加热装置均设在物料干燥舱和捕水器的外部；物料干燥舱和捕水器之间通过管道连接，并与制冷装置相互连接；加热装置与物料干燥舱连接，抽真空装置与捕水器连接。

5.根据权利要求4所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述物料干燥舱内部由隔层板将其分隔成若干层，每一层隔层板上均可放置物料托盘；所述物料托盘是在无底矩形框架里面铺上食品级塑料薄膜制成的软托盘；所述物料托盘还包括食品级塑料薄膜的固定件；将食品级塑料薄膜铺在无底矩形框架里面形成物料托盘的底，并使食品级塑料薄膜高于无底矩形框架侧壁上边框，再通过固定件将在无底矩形框架内形成托盘状的食品级塑料薄膜固定住，从而得到更加稳固的物料托盘。

6.根据权利要求4所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述物料干燥舱前端设置有进料泵，能将蛋白酶浓缩液送入物料干燥舱并均匀分装到物料托盘中。

7.根据权利要求4所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述物料干燥舱内部周边安装有能对物料干燥舱的内舱体或物料进行消毒或干燥的臭氧发生器和微波发生器。

8.根据权利要求4所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述抽真空装置包括罗茨真空泵、水环式真空泵，罗茨真空泵与捕水器通过管道连接，在罗茨真空泵与捕水器之间的管道上安装有真空压力表，水环式真空泵连接在罗茨真空泵的末端。

9.根据权利要求1所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述对蛋白酶浓缩液进行真空冷冻干燥分2个阶段进行：

第一阶段：进料完毕密封好物料干燥舱后开始制冷；先对蛋白酶浓缩液进行预冻，使物料干燥舱内的物料温度降至-30～-40℃；

第二阶段：待物料内水分完全结冰冻透后，对物料干燥舱进行抽真空，当物料干燥舱真空度达40～100Pa后，对物料进行加热，使物料中的水分在真空条件下升华除去；当物料温度与物料干燥舱内的真空度达到工艺要求时，真空冷冻干燥结束。

10.根据权利要求1～9任意一项所述蛋白酶的精制和干燥方法，其特征在于，所述蛋白酶包括枯草芽孢杆菌蛋白酶和地衣芽孢杆菌蛋白酶。