[发明专利]一种具有镇痛活性的PD-1靶向肽、其合成方法及其应用

权利要求书

1.一种具有镇痛活性的PD-1靶向肽，其特征在于，所述PD-1靶向肽为小分子多肽TP-01，其能够特异性的结合于PD-1的IgV区，其氨基酸序列为：ISYGGADYK，即Ile-Ser-Tyr-Gly-Gly-Ala-Asp-Tyr-Lys，分子量为973.04 g/mol。

2.一种具有镇痛活性的PD-1靶向肽的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）选取经过二氯甲烷溶胀处理后的 wang-树脂作为多肽合成载体；

（2）20% 六氢吡啶的 N，N-二甲基甲酰胺混合溶液作为 9-芴甲氧羰基的脱除试剂；

（3）N，N-二异丙基乙胺/ 1-羟基苯并三唑/ O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸盐作为多肽合成的缩合试剂，所用量为树脂物质的量的 3~6 倍；

（4）从肽序列的 C 端开始，依次在树脂上接入 N-alpha-芴甲氧羰基-N-epsilon-叔丁氧羰基-L-赖氨酸、N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸、N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯、N-芴甲氧羰基-L-丙氨酸、N-芴甲氧羰基-甘氨酸、N-芴甲氧羰基-甘氨酸、N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸、N-芴甲氧羰基-L-丝氨酸以及 N-芴甲氧羰基-L-异亮氨酸，所用量为树脂物质量的 1.5~3 倍；

（5）所得粗肽树脂经过二氯甲烷溶胀/无水甲醇压缩反复多次，采用切割试剂从肽树脂上获得粗肽、冷冻干燥、RP-HPLC 制备柱纯化，得到白色固体 TP-01，产率 65%。

3.根据权利要求2所述的一种具有镇痛活性的PD-1靶向肽的合成方法，其特征在于，所述步骤（5）中，切割试剂为三氟乙酸/三异丙基硅烷/ 双蒸水=95:2.5:2.5。

4.根据权利要求2所述的一种具有镇痛活性的PD-1靶向肽的合成方法，其特征在于，所述步骤（2）中，洗脱时间为 15 min，分3 次，5min/次进行洗脱。

5.根据权利要求2所述的一种具有镇痛活性的PD-1靶向肽的合成方法，其特征在于，整个合成反应在氩气保护下进行。