[发明专利]一种用于制备那西肽发酵液的方法

说明书

本申请提供的用于制备那西肽发酵液的方法中，将培养成熟的那西肽生产菌接种至发酵培养基中，一段时间后生成第一发酵液，然后向第一发酵液中补入菌渣水解液和硫酸盐溶液，在培养一段时间后生成第二发酵液，然后向第二发酵液中补入葡萄糖溶液即得到本申请中的那西肽发酵液；其中菌渣水解液中含有丰富的多肽和氨基酸，补料菌渣水解液和硫酸盐即补料多肽、氨基酸和硫酸盐，补料的菌渣水解液和硫酸盐一方面作为营养成分可以促进那西肽生产菌自身的生长；另一方面作为原料成为可以促进那西肽的合成，进而提高那西肽中A组分的含量；同时将菌渣水解液运用到发酵液的制备过程中，工艺简单易行，达到菌渣资源化利用，绿色环保，循环经济的目的。

技术领域

本申请涉及那西肽制备技术领域，尤其涉及一种用于制备那西肽发酵液的方法。

背景技术

那西肽是一种含硫多肽类抗生素，英文名Nosiheptide。那西肽最先于20世纪60年代发现，现在是多个国家允许使用的一种畜禽专用的抗生素。尽管我国于2019年颁布文件，禁止该抗生素长期添加于饲料中用于畜禽促生长，但是由于该类抗生素结构的特异性，对这类抗生素的工艺研究工作仍是方兴未艾。

那西肽是用微生物发酵方法生产的，发酵产物中有一主组分A，同时由于多肽类抗生素的合成过程中由于不同的前体物质能被少量替换加入到化学结构中，在产物合成过程中会形成一副组分B。另外，不同的培养基或培养方法也会改变产物的组成比例。为了便于描述，我们将主组分A称为A组分，副组分B称为B组分，其中A组分的生物抑菌活性高于B组分，提高A组分含量可以显著提高那西肽的抑菌活性，因此如何提高A组分含量为本领域技术人员需要解决的问题。

将那西肽生产菌接种到发酵培养基中发酵一段时间后得到发酵培养液，通过过滤、干燥、浸提等方式从发酵培养液中提取那西肽，提取后残留下的固含物成为菌渣，菌渣为危险废弃物，如何资源化利用菌渣同样成为本领域人员需要解决的问题。

因此，如何将提高A组分含量和资源化利用菌渣结合起来成为待解决的技术问题。

发明内容

本申请提供了一种用于制备那西肽发酵液的方法，以在提高A组分含量的基础上充分再利用菌渣。

本申请提供的用于制备那西肽发酵液的方法中，包括：

将那西肽生产菌接种至发酵培养基中，得到第一发酵液；

向所述第一发酵液中加入菌渣水解液和硫酸盐，得到第二发酵液；

向所述第二发酵液中加入葡萄糖溶液，得到那西肽发酵液。

可选地，所述菌渣水解液的制备包括：

将菌渣和4mol/L的硫酸按照1:6的比例进行水解得到菌渣水解液，所述水解的温度为80-90℃；

将得到的所述菌渣水解液中和至pH为6.5-7.5。

可选地，所述菌渣水解液体积占所述第一发酵液体积的1.5％-2.5％，所述硫酸盐重量占所述第一发酵液重量的1.0％-2.0％，所述葡萄糖重量占所述第二发酵液重量的13.0％-16.0％。

可选地，所述方法还包括培养那西肽生产菌，所述培养那西肽生产菌包括：

将所述那西肽生产菌接种至种子培养基中，于27℃-29℃下培养48-60h；

所述种子培养基按照重量比包括：葡萄糖2.5％-3％，玉米浆1.5％-2.5％，酵母浸出粉0.8％-1.2％，黄豆饼粉0.8％-1.2％，MgSO₄·7H₂O 0.03％-0.07％，(NH₄)₂SO₄ 0.3％-0.6％，轻质碳酸钙0.3％-0.6％。