[发明专利]一种单克隆抗体及其与间充质干细胞外泌体的联合应用

说明书

本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种单克隆抗体及其与间充质干细胞外泌体的联合应用，该单克隆抗体可高特异性与目标抗原TGF‑β2结合，进而用于治疗肝纤维化；还提供了一种间充质干细胞外泌体，尤其是经过HGF诱导的骨髓间充质干细胞外泌体，可用于治疗肝纤维化，降低炎症反应；还提供了所述单克隆抗体与所述间充质干细胞外泌体的药物组合物，用于联合治疗肝纤维化，可显著改善肝组织生理结构，抑制氧化应激对于肝组织损伤，促进胶原和其他细胞外基质降解，发挥协同效应促进肝组织恢复。

技术领域

本发明属于生物制药领域，具体涉及一种单克隆抗体及其与间充质干细胞外泌体的联合应用。

背景技术

肝纤维化是由于各种因素所致慢性肝或损伤，导致的细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)过度沉积或降解减少的病理过程，任何肝脏损伤在肝脏修复愈合的过程中都会伴随有肝纤维化，如果损伤处理不当，将可能导致肝硬化、肝癌、肝衰竭等多种严重肝病，然而肝纤维化也被认为是一个可逆的过程，如果治疗得当将可以逆转肝脏损伤过程，故肝纤维化阶段成为了治疗肝病的重要阶段。肝纤维化的发病机理比较复杂，现有研究表明病毒、细菌、寄生虫、药物、酒精、自身免疫等诸多因素均可以成为肝纤维化的诱因，在肝纤维化的发展过程中，肝星状细胞的活化和ECM的大量沉积具有重要地位，也成为肝纤维化的标志事件之一。目前已经开发出了多种治疗肝纤维化的药物，如乙肝或丙肝病毒抑制剂、转化生长因子-β(Transforming growth factor beta,TGF-β)抑制剂、抗氧化剂、干扰素、前列腺素E、肾上腺皮质激素、马洛替酯、硫辛酸、D-青霉胺以及中药制剂等，然而由于肝纤维化诱因众多，且多与机体自身免疫和调节有关，现有药物或疗法仍难以有效治疗肝纤维化。

细胞外泌体(exosome)为细胞分泌的微小囊泡，最初发现时被认为是一种代谢废物，但后续的研究中发现外泌体中包括多种核酸、多肽和蛋白质等多种生物活性物质，能通过组织液或血液运输至靶细胞，在细胞间信息传递过程中发挥重要作用，临床上已经外泌体用于皮肤损伤、恶性肿瘤、神经损伤、肝损伤、肾损伤和其他疾病。间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一种来自于中胚层的多能干细胞，具有包括高度的自我更新、多向分化及免疫调节能力，来源于间充质干细胞外泌体(exosomesfrommesenchymal stem cells，MSCs-Exo)，即保留了诸多间充质干细胞的生物活性，也能避免细胞治疗过程的操作繁琐、成本高昂、伦理风险等不利因素，故受到了广泛关注，有研究表明MSCs-Exo能够有效修复肝损伤，对肝脏起到一定的保护作用，抑制和逆转肝纤维化过程，如王如岭等[1]发现在小鼠模型中注射骨髓来源的MSCs-Exo能够改善肝纤维化过程；Yan等[2]发现人脐带MSCs-Exo能够通过诱导ERK1/2磷酸化和Bcl2基因表达以及抑制IKKB/NFkB/Caspase9/3信号通路，减少肝细胞氧化损伤和抑制肝细胞凋亡；Chen等[3]将骨髓MSC-Exo用于治疗S100诱导的C57BL/6小鼠自身免疫性肝炎，表明MSC-Exo可通过miRNA-223调节NLRP3和Caspase-1表达进而发挥肝脏修复和保护作用。近年来，尽管MSC-Exo成为了肝脏疾病治疗领域的研究热点，但是其作用机制仍不明确，其治疗剂量、制备方法和临床应用尚无统一标准，在一定程度上制约了其应用。