[发明专利]一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法

权利要求书

1.一种采用HPLC法同时测定强力定眩片中12种化学成分含量的方法，其特征在于，所述的12种化学成分为天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内脂以及蒙花苷，所述的方法包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备

取供试品5-10片，去除薄膜衣，研细，精密称取0.4g，置5mL量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理15-45min，放冷，加稀乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(2)对照品溶液的制备

精密称取天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、香草酸、对羟基苯甲醛、松脂醇二葡萄糖苷、槐角苷、藁本内酯、蒙花苷对照品适量，加甲醇制成混合对照品溶液；

(3)单味药材及阴性样品溶液的制备

采用水煎煮、乙醇回流提取、浓缩和减压干燥工艺，分别制备天麻、杜仲、杜仲叶、野菊花、川芎单味药材样品和缺天麻、缺杜仲和川芎、缺杜仲和杜仲叶、缺野菊花和川芎的阴性模拟样品，按步骤(1)的方法制成相应阴性对照溶液；

(4)HPLC法测定12种化学成分含量

色谱柱：Lamdo Stamsil C₁₈柱，250×4.6mm，5μm；流动相乙腈A-0.05％磷酸水溶液B，梯度洗脱：0～5min，5％～7％A；5～15min，7％A；15～30min，7％～12％A；30～90min，12％～20％A；90～100min，20％～50％A；检测波长：280nm；进样量：5μL；体积流量：0.8mL/min；柱温：30℃；

(5)线性回归方程的制备

分别精密吸取混合对照品溶液适量，逐级稀释成一系列不同质量浓度的标准溶液，按步骤(4)的色谱条件进样测定，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，得到线性回归方程；

(6)供试品溶液中12种化学成分含量的测定

吸取供试品溶液按步骤(4)的色谱条件进样测定，得到供试品溶液中12种化学成分的色谱图，并确定相应的峰面积，分别将12种化学成分的峰面积带入所述线性回归方程，即可得到样品溶液中12种化学成分的含量。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中超声处理的时间为15-30min，功率为250W，频率为40kHz。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中每1mL所述的混合对照品溶液中含天麻素1.045mg、没食子酸1.002mg、5-羟甲基糠醛0.185mg、对羟基苯甲醇0.41mg、新绿原酸0.102mg、绿原酸0.1mg、香草酸0.135mg、对羟基苯甲醛0.136mg、松脂醇二葡萄糖苷0.109mg、槐角苷0.108mg、藁本内酯22mg、蒙花苷0.111mg。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中所述的稀乙醇为45％-55％v/v的乙醇溶液。