[发明专利]一种亮氨酸脱氢酶突变体及其编码基因、基因工程菌以及在制备L-叔亮氨酸中的应用有效
| 申请号： | 202110455494.2 | 申请日： | 2021-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN113106078B | 公开（公告）日： | 2022-09-16 |
| 发明（设计）人： | 王华磊;魏东芝;孟祥奇 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/06 | 分类号： | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 余永莉 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 亮氨酸 脱氢酶 突变体 及其 编码 基因 基因工程 以及 制备 中的 应用 | ||
1.一种活性提高的亮氨酸脱氢酶突变体，其特征在于，所述亮氨酸脱氢酶突变体包括：
以SEQ ID NO.1所示野生型的亮氨酸脱氢酶LaLeuDH为模板，第153位的天冬氨酸D突变为天冬酰胺N的亮氨酸脱氢酶突变体D153N，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
以SEQ ID NO.1所示野生型的亮氨酸脱氢酶LaLeuDH为模板，第191位的组氨酸H突变为天冬酰胺N的亮氨酸脱氢酶突变体H191N，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；
以SEQ ID NO.2所示突变型的亮氨酸脱氢酶突变体D153N为模板，第191位氨基酸残基发生组氨酸H突变为天冬酰胺N后的亮氨酸脱氢酶突变体D153N/H191N，其氨基酸序列如SEQID NO.4所示。
2.一种如权利要求1所述的活性提高的亮氨酸脱氢酶突变体的编码基因。
3.一种包含根据权利要求2所述的亮氨酸脱氢酶突变体的编码基因的重组载体与基因工程菌。
4.一种根据权利要求1所述的亮氨酸脱氢酶突变体在催化三甲基丙酮酸制备L-叔亮氨酸中的应用。
5.一种根据权利要求3所述的包含亮氨酸脱氢酶突变体的编码基因的重组载体与基因工程菌在催化三甲基丙酮酸制备L-叔亮氨酸中的应用。
6.一种制备L-叔亮氨酸的方法，其特征在于，包括在酶催化体系的存在下使三甲基丙酮酸发生还原反应生成L-叔亮氨酸，所述酶催化体系包括用于三甲基丙酮酸转化为L-叔亮氨酸的根据权利要求1所述的亮氨酸脱氢酶突变体。
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