[发明专利]用贻贝制备牛磺酸的方法

说明书

本发明涉及用贻贝制备牛磺酸的方法，尤其是涉及一种从冻干贻贝粉中提取牛磺酸的方法。其步骤为：将新鲜贻贝进行冷冻干燥而后研磨制成冻干贻贝粉，用水进行提取，沉淀除蛋白，过阳离子交换柱纯化，将洗脱液进行浓缩，加入无水乙醇析出牛磺酸粗品，再加入无水乙醇重结晶得到牛磺酸纯品。本发明利用细胞破碎技术，对贻贝鲜肉制备成冻干贻贝粉再加以提取，可使贻贝中天然牛磺酸提取率增加。为实现贻贝资源的综合利用，促进贻贝产业的健康持续发展提供技术支持。

技术领域

本发明涉及牛磺酸的制备方法，特别涉及用贻贝制备牛磺酸的方法。

背景技术

牛磺酸，又称为牛胆素和牛胆碱，是一种非蛋白质氨基酸。牛磺酸具有消炎、解热镇痛和促进大脑发育、增强视力、调节神经传导及促进吸收，不仅参与维持机体内环境稳定，而且对中枢、消化、生殖、心血管、免疫和内分泌等系统生理功能的正常发挥具有重要调节作用，因此，被广泛应用于食品工业、饲料工业和医药工业等诸多领城。

牛磺酸广泛分布于动物各组织细胞液中，在水产动物尤其是海洋动物体内含量极为丰富。研究表明，海洋生物贻贝的含有较高含量的牛磺酸，贻贝中牛磺酸的含量约占总氨基酸的3.9％。牛磺酸绝大部分分布在细胞内，各种组织细胞内外牛磺酸浓度从100:1到50000:1。因此，细胞膜充分破裂有助于更完全地释放出牛磺酸，从而提高牛磺酸的提取率。提取牛磺酸采用何种细胞破碎技术是直接影响到牛磺酸得率的第一关键因素。

然而，贻贝在我国虽有极丰富的资源，但由于加工技术落后，被认为是一种低值海产品，90％的贻贝用于生鲜、冷冻制品的销售，附加值低下，资源浪费严重。关于如何利用贻贝制备牛磺酸的研究较少。

发明内容

本发明的目的在于解决现有的天然牛磺酸提取方法提取成本高、提取率低的问题。利用细胞破碎技术，提供一种提取率高，提取工艺简单，提取成本低的从贻贝粉中提取牛磺酸的方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种用贻贝制备牛磺酸的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)冷冻干燥：取新鲜贻贝数只，将肉挖出，称重，放入-20℃冰箱冷冻4小时或者放入液氮中1-3分钟，取出后放入已经预冷的冷冻干燥机，干燥后取出。

(2)研磨、过筛：将冷冻干燥后的贻贝肉用小型万能粉碎机粉碎，得冻干贻贝粉，经筛网过筛。

(3)提取：加入纯化水，置于恒温水浴锅中，加热提取，冷却至室温，用4层纱布进行过滤，滤液浓缩至其体积的约1/6倍。

(4)除蛋白：在浓缩液中缓慢加入6mol/L盐酸溶液，调节pH至3.00，离心去除酸性蛋白，取上清液；在上清液中缓慢加入5mol/LNaOH，调节pH至10.00，离心去除碱性蛋白，取上清液；上清液再次用6mol/L盐酸溶液调节pH至4.00，离心去除酸性蛋白。

(5)纯化：取适量浓缩提取液，使其经过强酸性阳离子交换树脂，用超纯水洗脱，试管收集洗脱液，每管约10mL，对收集到的洗脱液进行电导率测定，记录流出液的电导率的变化，并收集电导率从开始下降至稳定期间的洗脱液，即为牛磺酸含量较高的洗脱液。

(6)浓缩：将收集到的洗脱液用旋转蒸发仪进行浓缩，至原体积的1/10。

(7)重结晶：在浓缩洗脱液中加入无水乙醇，放入4℃冰箱，即可析出粗品牛磺酸，粗品牛磺酸加适量水溶解，再加入无水乙醇，反复多次可得到纯度较高的牛磺酸晶体。

其中所述6mol/L盐酸溶液为水与质量浓度为37％的浓盐酸按1:1的体积比混合而得。

牛磺酸提取率计算方法如下，以冷冻干燥前贻贝鲜肉质量计算：

式中：