[发明专利]一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法

权利要求书

1.一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，步骤如下：

步骤一、将革兰氏阴性菌大肠杆菌接种到能够保证其正常繁殖的灭菌的培养基中，培养，离心，得到的湿菌体洗涤后，离心，重悬，得到含有革兰氏阴性菌大肠杆菌的悬浊液；

所述步骤一中，湿菌体用0.5-2％NaCl溶液洗涤后，重悬于0.5-2％NaCl溶液；

步骤二、按照每份样品中的革兰氏阴性菌大肠杆菌的OD₆₀₀值相等为标准，分装两份以上的样品，一份样品加入体积为V的去离子水，得到对照样品，剩余样品加入体积为V的待测水样，不同样品中加入的体积为V的待测水样的浓度相同或者不同，得到检测样品；

相同培养条件下，培养对照样品和检测样品，培养完成后，离心去除上清液，清洗至待测水样被完全去除，分别加入终浓度为N的对苯醌，0.5-50min观察对照样品和检测样品的颜色，如果培养后的检测样品与对照样品颜色一致，则待测水样无毒，如果培养后的检测样品与对照样品颜色不一致，则待测水样有毒；

所述N为0.01-10mM。

2.根据权利要求1所述的一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，所述步骤一中，培养基为PB培养基、M9培养基、LB培养基、PYO培养基中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，所述步骤一中，培养基的灭菌方法为：将培养基超声混匀，封口，在121℃，1个大气压下灭菌15-30min后，冷却，得到灭菌的培养基。

4.根据权利要求1所述的一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，所述步骤一中，培养的条件为30-40℃振荡培养12-20h，振荡速度为150-250rpm。

5.根据权利要求1所述的一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，所述步骤一中，离心的条件分别独立的为3000-8000rpm离心2-10min。

6.根据权利要求1所述的一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，所述步骤二中，洗涤采用5-200mM的PBS或0.5-2％NaCl溶液。

7.根据权利要求1所述的一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，所述步骤二中，培养条件是：将对照样品和检测样品在30-40℃振荡培养0.5-2h，振荡速度为150-250rpm。

8.根据权利要求1所述的一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，所述步骤二中，对苯醌以含有对苯醌的缓冲液的形式添加，缓冲液为20-100mM的PBS，对苯醌的浓度为0.01-10mM。

9.根据权利要求1所述的一种简单、快速的水体总毒性比色检测方法，其特征在于，待测水样含有一种或多种重金属离子，重金属离子为Cu²⁺、Hg²⁺中的一种或两种，离子浓度为0.2mg L^-1-50mg L^-1。