[发明专利]基于LFD-RPA技术的水稻细菌性条斑病菌检测试剂盒及其引物探针组合物与应用在审
申请号: | 202110459276.6 | 申请日: | 2021-04-27 |
公开(公告)号: | CN113151522A | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | 田茜;罗金燕;相宁;周佩;赵文军;罗来鑫 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/01 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100176 北京市大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 lfd rpa 技术 水稻 细菌性 病菌 检测 试剂盒 及其 引物 探针 组合 应用 | ||
1.检测水稻细菌性条斑病菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括检测水稻细菌性条斑病菌的组合物和LFD试纸;所述组合物包括引物XOC367-3F、引物XOC367-3R和探针Probe;所述引物XOC367-3F的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述引物XOC367-3R的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示,所述探针Probe的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述引物XOC367-3R的5’端用生物素标记。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述探针Probe具有下述任一修饰或其组合:
A1)在所述探针Probe的5’端起第30-35位碱基中的任一个碱基位置标记四氢呋喃;
A2)在所述探针Probe的5’端标记荧光基团;
A3)在所述探针Probe的3’端用胺基、磷酸基团或C3-spacer标记。
4.根据权利要求1-3任一所述的试剂盒,其特征在于,所述探针Probe的5’端标记FAM、距5’端33位碱基和34位碱基中间用四氢呋喃修饰以及3’端标记C3-spacer。
5.权利要求1-4中任一所述的组合物。
6.检测水稻细菌性条斑病菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:
B1)提取待测样品基因组DNA;
B2)以所述基因组DNA为模板,用权利要求1-4任一所述的组合物进行LFD-RPA检测;根据LFD试纸条条带确定待测样品是否含有水稻细菌性条斑病菌。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,根据LFD试纸条条带确定待测样品是否含有水稻细菌性条斑病菌的方法为:如果LFD试纸条出现两条紫红色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明待测样品中含有水稻细菌性条斑病菌;如果LFD试纸条只出现一条紫红色条带,位于质控区内,则结果为阴性,表明待测样品中不含有水稻细菌性条斑病菌。
8.权利要求1-4任一所述的试剂盒在水稻细菌性条斑病菌的检测或辅助检测中的应用。
9.权利要求5所述的组合物在水稻细菌性条斑病菌的检测或辅助检测中的应用。
10.权利要求5所述的组合物在制备用于水稻细菌性条斑病菌的检测或辅助检测的产品中的应用。
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